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为了在体内高效表达反义RNA,三链形成RNA与Ribozxyme,通过PCR克隆技术构建了一种全新载体pBSKnerrU6’。该载体利用hsnRNA U6基因表达单元的特性,保留了U6RNA分子5’端维持分子稳定性的发夹和帽式结构的序列,缺失了其中间参与mRNA前体剪切的部分,取而代之的是3个限制性内切酶位点,Hela细胞核抽提物体外转录实验证明该载体可有效地表达U6变体RNA分子,该载体携带新霉素抗性基因neo^r,因而可用于真核细胞核细胞稳定转染的筛选。