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目的
通过诱导非典型蛋白激酶C(aPKC)基因沉默增加胶质瘤干细胞对化疗药物的敏感性,为根治胶质瘤干细胞提供理论支持。
方法流式细胞术分离大鼠C6胶质母细胞瘤侧群细胞,RNA干扰(RNAi)技术沉默C6侧群细胞aPKC表达,MTT和锥虫蓝实验检测单纯疱疹病毒-胸苷激酶(HSV-tk)/更昔洛韦(GCV)对C6侧群细胞的杀伤效果;建立裸鼠皮下胶质瘤模型,测量肿瘤体积,肿瘤组织块称重,原位凋亡法检测细胞凋亡。
结果C6侧群细胞aPKC基因被有效沉默后,可显著增加其对HSV-tk/GCV药物的敏感性,表现为细胞凋亡和死亡数明显增加(P<0.05);体内实验显示肿瘤体积和重量较对照组明显减小(P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05)。
结论通过诱导aPKC基因沉默可进一步增加胶质瘤干细胞对化疗药物HSV-tk/GCV的敏感性,为胶质瘤干细胞的基因治疗提供了新的方法选择。