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目的
探讨微小核糖核酸(miRNA)-146a在寻常型银屑病患儿外周血CD4+ T淋巴细胞的调控机制。
方法采用实时荧光定量PCR检测2013年10月至2015年12月就诊于本院皮肤性病科门诊的寻常型银屑病患儿30例和30名正常对照儿童外周血CD4+ T淋巴细胞miRNA-146a表达水平,免疫磁珠法分选外周血CD4+ T淋巴细胞,将分离的细胞分为对照组、miRNA-146a模拟体组和miRNA-146a抑制物组,并进行细胞培养;流式细胞术检测辅助性T细胞Th1数量,免疫印迹法和荧光定量PCR分别检测IFN-γ受体α(IFN-γRα)蛋白和mRNA的表达,酶联免疫吸附试验检测血浆和体外细胞培养上清液干扰素(IFN)-γ表达水平。
结果寻常型银屑病患儿外周血CD4+ T淋巴细胞miRNA-146a与血浆IFN-γ表达较正常对照组升高[(2.43±0.94)vs(1.05±0.23),(27.69±7.64)ng/L vs(9.75±2.81)ng/L],均P<0.01,且miRNA-146a的表达与血清IFN-γ呈正相关(r=0.837,P<0.01)。体外CD4+T淋巴细胞培养结果显示,与对照组比较,miRNA-146a模拟体组Th1数量、培养液上清IFN-γ水平显著增加,IFN-γRα蛋白表达降低,均P<0.01。miRNA-146a抑制物可有效地阻断miRNA-146a对Th1细胞的调控作用。
结论miRNA-146a通过影响Th1细胞的分化和功能参与对寻常型银屑病患儿外周血CD4+ T淋巴细胞的调控,在寻常型银屑病发病过程中可能发挥着一定的作用。