牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系细胞因子研究

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  摘 要 目的:研究健康者和成人牙周炎患者牙周组织中牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系中白细胞介素-4、白细胞介素-10及γ-干扰素的比例。方法:Elisa法检测牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系中CD4+、CD8+T细胞所占比例,流式细胞仪检测三种细胞因子数量。结果:两组间3种细胞因子表达无显著差异,但部分个体γ-干扰素表达高于其他两种细胞因子的表达。结论:牙龈卟啉菌阳性个体易患牙周疾病者,γ-干扰素表达增高。
  关键词 细胞因子 T细胞 牙龈卟啉菌 牙周疾病
  
  材料和方法
  
  選取7例成人牙周炎患者,指标:至少4个位点上牙周袋>5mm,骨吸收>6mm,年龄47±3.35岁;10例健康或牙周仅有轻度炎症者,炎症位点不超过4个,骨吸收<3.5mm,年龄44.14±2.46岁。
  牙龈卟啉菌(Pg)[1]及Pg血清学检测;牙周探针深入牙周袋或龈沟内,取出后放入1mlPBS中,Elisa法进行Pg及Pg血清学检测。
  Pg培养:Pg ATCC33277,常规培养,提取其外膜物质,显微镜下观察菌体。
  T细胞系的制备:每例个体抽取5ml外周血,高密离心法获取单个核细胞,37℃孵化14天,加入Pg抗体1周后,PBS洗细胞,静置1周;加入IL-2,28天后Pg阳性T细胞系制备完成。
  流式细胞仪检测:PBS加0.1%盐酸缓冲液冲洗T细胞以获取其外膜物质,加入鼠抗人CD4或CD8抗体,4℃孵化30分钟,分别加入IL-4,IFN-γ、IL-10抗体,选流式细胞仪检测。进行统计学分析。
  
  结 果
  
  成人牙周炎、健康组两组间CD4+、CD8+T细胞中IFN-γ与IL-4比值、IFN-γ与IL-10比值无显著差异。
  两组间CD4+,CD8+T细胞IFN-7表达量高于IL-4、IL-10表达量。健康个体B的CD4+ T细胞中IL-4、IL-10表达高于IFN-γ;个体C的IL-10表达高于IFN-γ;CD8+T细胞中F、G个体IL-4或IL-10表达高于IFN-γ;成人牙周炎个体CD4+T细胞中,F、G个体IL-4表达高于IL-10,IL-10高于IFN-γ。其余个体均为IFN-γ表达量最高,成人牙周炎个体CD4+T细胞中,I、H、O、P、Q5例个体中IL-4和(或)IL-10表达高于或近似于IFN-γ;CD8+T细胞中,I、H、O、P、q、K6例个体中IL-4和(或)1L-10高于IFN-γ表达。
  
  讨 论
  
  健康牙龈组织中T细胞记忆细胞不表达IL-4,成人牙周炎牙龈位点用Pg抗体刺激后表达高IL-4。这些研究结果表明,牙周疾病中IL-4的高表达可能打破了其他细胞因子间的平衡。
  实验证明,在牙周疾病中牙龈组织中IFN-γ表达显著,本实验中CD4+、CD8+T细胞系中IFN-γ表达量均高于IL-4、IL-10。根据以上数据推测,在牙周疾病过程中,牙龈牙周组织的破坏可能经由IFN-γ产生以及巨噬细胞等的潜在刺激引起[2]。Stein等已证实,成人牙周炎患者牙龈组织中IL-10表达量远高于非炎性牙龈组织。同时IL-l0抗原可诱导胶原纤维减少[3]。
  本研究结果表明,研究健康者和成人牙周炎患者间,牙周组织中牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系中白细胞介素-4、白细胞介素-10及γ-干扰素表达无显著差异,但部分个体γ-干扰素表达高于其他两种细胞因子的表达,证实牙龈卟啉菌阳性个体易患牙周疾病者,γ-干扰素表达增高。
  
  参考文献
  1 路宝风.牙龈卟啉茵的研究进展.临析医学专科学校学报,2002,24(1):66-68.
  2 杨琼,王雷,房金波.牙龈卟啉菌表面蛋白的生物活性和免疫原性研究.分子科学学报,2003,19(3):151-155.
  3 谢红帽,李昂,苟建重,等.牙龈卟啉菌菌毛的研究进展.陕西医学杂志,2006,35(1):89-91.
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