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目的：构建pEGFP—X真核表达载体，观察其在肝癌细胞株中的表达。方法：从质粒pcDNA3．1（＋）-X酶切获HBVX基因片段，克隆至pEGFP—N1；用酶切、PCR和测序鉴定pEGFP—X载体；用脂质体法，将重组载体（pEGFP—X）和空载体（pEGFP-N1）瞬时转染肝癌细胞细胞株BEL-7402；分别用RT—PCR、荧光显微镜鉴定HBVX和EGFP基因表达。结果：鉴定证实pEGFP-X载体构建成功；该质粒瞬时转染的BEL-7402有HBVX基因表达，并发绿色荧光。结论：构建的pEGFP—X真核载体能