无膝关节骨性关节炎者关节液中Ⅱ型胶原代谢产物的检测及临床意义

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhao3785
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我们通过检测无膝关节骨性关节炎者中软骨缺损者、软骨相对正常者和膝关节骨性关节炎(KOA)患者关节液中Ⅱ型胶原降解产物Ⅱ型胶原C-肽端(CTX-Ⅱ)和Ⅱ型胶原羧基末端3/4片段(C2C)的浓度,探讨膝关节液中C2C和CTX-Ⅱ的浓度对膝关节软骨缺损的诊断价值.rn一、资料与方法rn1.一般资料:选取2012年3月至2013年10月我院体检科符合无KOA临床症状诊断及入选标准的63例为实验组及37例KOA患者为对照组.并将实验组分为实验1组:软骨相对正常组32例和实验2组:软骨缺损组31例.rn2.膝关节液标本的采集和保存:严格的无菌操作抽取受试者关节液0.3~5.0ml.3 000转/分离心5min,留取上清液,快速冷冻,储存在-70℃冰箱内待测.rn3.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测关节液中CTX-Ⅱ和C2C的含量:将关节液标本从-70℃冰箱移至室温下,完全解冻后,稀释100倍.将标准液及待测标本各100μl加入包被有单抗的96孔反应板中,37℃温育2h;分别加入检测溶液A、B工作液100μl,37℃温育1h,洗板5次,每孔加入底物工作液90μl,37℃避光30 min;最后每孔加入终止液50μl,15 min内在450 nm波长下测量各孔的吸光度值(A)值.
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