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黑曲霉N25植酸酶phyA基因在巴斯德毕赤酵母中高效表达的研究

来源 :菌物系统 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong562
【摘 要】
：
从黑曲霉N25（A.niger China strain)中提取出染色体DNA，根据已经测定出的植酸酶phyA基因全序列设计了一对引物，采用高保真度的聚合酶Advangage-HF扩增到了去除信号肽和内含子后
【作 者】
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王红宁 刘世贵 等 
【机 构】
：
四川农业大学动物科技学院,四川大学生命科学学院
【出 处】
：
菌物系统
【发表日期】
：
2001年4期
【关键词】
：
黑曲霉 植酸酶 PHYA基因 毕赤酵母 高效表达 转化子 载体 Aspergillus Niger  phytase  phyA gene  Picha Pas 
【基金项目】
：
获国家科技部“九五”国家重点科技攻关计划资助,专题编号99-009-02-02
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从黑曲霉N25（A.niger China strain)中提取出染色体DNA，根据已经测定出的植酸酶phyA基因全序列设计了一对引物，采用高保真度的聚合酶Advangage-HF扩增到了去除信号肽和内含子后约1．4kb片段，对该片段进行了克隆及序列测定。将该序列与植酸酶phyA基因全序列进行了比较。以此片段构建成功了pPIC9K-phyA载体（命名为pPNP-1)，并转化毕赤巴斯德酵母，经G418抗性筛选，酶活性测定，Southern 印迹和Western印迹，获得了高效表达的转化子PP－NP－1（23
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