【摘 要】
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目的:构建人角质细胞生长因子2(hKGF2)基因的高效原核表达载体pET-30a(+)-hKGF2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达。方法:从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增
【机 构】
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山东省医学科学院基础医学研究所,山东大学山东省立医院生殖医学研究中心
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目的:构建人角质细胞生长因子2(hKGF2)基因的高效原核表达载体pET-30a(+)-hKGF2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达。方法:从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出去除了信号肽部分的hKGF2基因,克隆到pMD18-T载体,经DNA序列分析后与pET-30a(+)表达载体连接,在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达6×His-hKGF2,用SDS-PAGE及Western印迹鉴定表达蛋白。结果:构建了表达载体pET-30a(+)-hKGF2,经I
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