观察小干扰RNA(siRNA)沉默环氧化酶-2(COX-2)基因表达对胃癌SGC-7901细胞放射敏感性的影响。
方法将阴性对照siRNA(si-NC)或者si-COX-2转染到胃癌SGC-7901细胞中,0、2、4、6、8、10 Gy剂量的X射线放射处理细胞,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测转染前后COX-2的mRNA和蛋白表达,噻唑蓝(MTT)方法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,克隆形成实验分析转染前后细胞放射敏感性的变化,Western blot检测转染前后抑癌基因p21和促凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)的表达水平的变化。
结果射线照射后,COX-2在mRNA水平和蛋白水平均明显升高(P=0.003, P=0.002)。不同强度的射线照射下,沉默COX-2后,SGC-7901细胞的增殖抑制率明显提高。6 Gy时,增殖抑制率分别为(20.78±3.86)%和(32.17±4.56)%,P=0.031;8 Gy:P=0.028;10 Gy:P=0.009,凋亡率明显提高:4 Gy时,凋亡率分别为(15.21±2.06)%和(22.78±3.17)%,P=0.046;6 Gy:P=0.029;8 Gy:P=0.025;10 Gy:P=0.014,SGC-7901细胞克隆形成能力明显下降:4 Gy时,细胞克隆数分别为(435±52)个和(718±83)个,P=0.008;6 Gy:P=0.006;8 Gy:P=0.002;10 Gy:P=0.004,8 Gy射线照射下,沉默COX-2后,P21和bax表达水平明显升高(P=0.007、P=0.005)。
结论siRNA沉默COX-2表达能够增强胃癌SGC-7901细胞放射敏感性。