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建立了一种简便、快速的双波长比吸光度法，用于测定甾类化合物HMPDD和相应脱氢产物HMPTD组成的混合物中的HMPTD质量分数，其质量分数与HMPDD和HMPTD混合物的比吸光度（A267／A253）线性相关，回归方程为Y=3．05X-0．739，相关系数0．9995．分别采用双波长比吸光度法和HPLC法对不同HMPTD质量分数的微生物脱氢转化样品进行测定，两者的相对误差小于2％，表明建立的双波长比吸光度法可用于HMPDD微生物脱氢反应过程的中间检测分析．