【摘 要】
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目的:构建结核分枝杆菌(M T B)16k D-38k D-19k D融合基因重组质粒,并对融合蛋白进行表达及纯化.方法:利用P C R方法分别扩增16kD、38kD及19kD基因,经过双酶切依次与pET28a载
【机 构】
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目的:构建结核分枝杆菌(M T B)16k D-38k D-19k D融合基因重组质粒,并对融合蛋白进行表达及纯化.方法:利用P C R方法分别扩增16kD、38kD及19kD基因,经过双酶切依次与pET28a载体连接,构建pET28a-16kD-38kD-19kD融合基因重组质粒,转化至大肠杆菌表达株B L21中,经I P T G诱导获得目标蛋白,并进行镍柱纯化.结果:经过酶切及测序鉴定证实p E T28a-16k D-38k D-19kD重组质粒构建正确,并经原核表达及纯化获得融合蛋白.结论:成功构建并表达纯化16kD-38kD-19kD融合蛋白,为结核病特异性诊断抗原的开发奠定了基础.
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