【摘 要】
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目的:建立方便、快速、高效的小鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的分离培养方法,为相关研究提供快速获取原代VSMC的方法技术。方法:分离小鼠主动脉,
【机 构】
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川北医学院生化教研室,川北医学院药理教研室
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目的:建立方便、快速、高效的小鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的分离培养方法,为相关研究提供快速获取原代VSMC的方法技术。方法:分离小鼠主动脉,用Ⅰ型胶原酶消化血管组织去除内皮细胞等杂细胞;将血管切成1mm2大小组织块种植于六孔细胞培养板孔底,用分离培养液诱导原代VSMC细胞的繁殖生长。光学显微镜观察细胞形态特征;免疫组化方法鉴定VSMC特异性蛋白α-SMA的表达;RT-PCR方法检测VSMC特异性蛋白α-SMA和SM22α的mRNA表达水平。结果:本方法分离原代VSMC,3d后可见长梭状VSMC从组织块边缘长出,7d后可以进行传代。光学显微镜观察显示,分离细胞具有平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)形态特征;免疫组化分析显示,分离细胞α-SMA蛋白表达阳性;RT-PCR分析显示,分离细胞中α-SMA和SM22α在mRNA水平高表达。结论:本实验成功建立了一种简便、快捷、高效从组织块分离培养VSMC的改良方法,为快速获得原代VSMC提供了一种适用的方法技术。
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