【摘 要】
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目的 初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药耐药性
【机 构】
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赣南医学院第一附属医院呼吸科,中山大学附属第三医院呼吸科,江西省胸科医院结核科,江西省胸科医院检验科,江西省赣州市第五人民医院检验科
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目的 初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药耐药性的可行性.方法 采用DNA测序方法和MAS-PCR技术,对江西省52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌进行耐药相关基因突变位点检测.结果 DNA测序分析:39株耐氧氟沙星(Ofx)菌株中,32株存在gyrA基因错义突变,2株发生gyrB基因错义突变.29株耐卡那霉素(Km)或卷曲霉素(Cm)菌株中,22株为rrs1401位点A→G突变.52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌,40株为北京基因型(76.92％,40/52),其中17株北京基因型菌株发生gyrA-GAC94GGC突变(42.50％,17/40),19株北京基因型菌株发生rrs-A1401G突变(47.50％,19/40).北京基因型与基因突变类型gyrA-GAC94GGC和rrs-A1401G无明显相关性(x2=1.16、1.92,P值均＞0.05).MAS-PCR检测Ofx耐药株的敏感度为61.54％(24/39),检测Km或Cm耐药株的敏感度为79.31％(23/29).结论 gyrA基因94位密码子突变是江西省结核分枝杆菌Ofx耐药的主要机制；rrs-A1401G突变则是Km或Cm耐药的主要原因.MAS-PCR方法对于快速检测二线抗结核药的耐药性有一定的临床应用价值.
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