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目的
研究磷酸肌醇依赖性激酶1（PDK1）在内皮细胞向造血细胞转化阶段对造血干细胞（HSC）发生的影响。
方法应用Vec-Cre在内皮细胞中特异性敲除PDK1基因，取对照组PDK1fl/fl、PDK1fl/+小鼠及敲除组Vec-Cre；PDK1fl/fl小鼠胚胎的主动脉-性腺-中肾区（AGM区）细胞进行集落形成实验，检测PDK1基因对造血祖细胞功能的影响；取对照组和敲除组AGM区细胞行移植实验，检测PDK1对HSC功能的影响；取对照组和敲除组AGM区细胞，通过流式细胞术检测PDK1对能够向造血转化的CD31+c-Kithigh细胞群比例、细胞周期及细胞凋亡的影响；分选对照组和敲除组AGM区CD31+ c-Kithigh细胞群，通过Real-time PCR检测PDK1对内皮向造血转换相关的转录因子（RUNX1、P2-RUNX1、GATA2）的影响。
结果PDK1敲除后，造血祖细胞形成的克隆形态变小，数目减少[敲除组CFU-GM为（24±5）个/ee，对照组为（62±1）个/ee，P=0.001]；破坏了造血干细胞重建造血及多向分化的能力（敲除组移植5只，0只重建，对照组移植7只，5只重建，P=0.001）；AGM区CD31+c-Kithigh比例降低[敲除组CD31+c-Kithigh比例为（0.145±0.017）%，对照组比例为（0.385±0.04）%，P=0.001]；并且AGM区由内皮细胞向造血细胞转换的关键转录因子表达下降，但对CD31+c-Kithigh细胞的增殖和凋亡无明显影响。
结论在内皮细胞中特异敲除PDK1基因，导致具有向造血转化的内皮细胞群比例降低，影响了HSC的发生，破坏了HSC重建造血的能力。