目的 探讨miR-720在急性髓系白血病(AML)患者中的表达水平、调控机制及其与白血病肿瘤生物学行为的关系.方法 采用荧光定量PCR检测38例AML患者和20名正常对照骨髓细胞miR-720表达水平;采用焦磷酸测序法定量检测AML患者和正常对照miR-720启动子甲基化水平;构建慢病毒介导的miR-720过表达kasumi-1细胞,采用流式细胞术、WST-1法、集落形成实验、Transwell细胞迁移实验及Western blot法分别检测miR-720对kasumi-1细胞增殖、凋亡、细胞周期、集落生成、迁移及P53介导的细胞凋亡通路的影响.采用重亚硫酸盐测序法检测地西他滨处理前后kasumi-1细胞miR-720甲基化水平,采用荧光定量PCR检测地西他滨处理后kasumi-1细胞miR-720表达水平.结果 与正常对照相比,AML患者miR-720表达水平明显降低(0.69±0.09对3.00±0.46,P＜0.01),且miR-720启动子区域呈现显著高水平的DNA甲基化[(75.56±2.35)％对(47.65±2.78)％,P＜0.01].miR-720过表达的kasumi-1细胞自身凋亡率明显增高(P=0.017),对细胞毒药物依托泊苷的凋亡敏感性也明显增加(P=0.004),细胞增殖明显受抑(P＜0.01),细胞集落形成能力减弱(P=0.005),细胞周期阻滞于G1/G0期,细胞迁移能力下降.miR-720的过表达显著诱导kasumi-1细胞P53凋亡相关蛋白的表达包括P53、Bax以及诱导NF-κB信号转导通路的激活.地西他滨处理后的kasumi-1细胞miR-720表达水平较处理前明显增高,而启动子甲基化水平明显降低.结论 AML患者骨髓细胞miR-720表达水平明显降低,DNA甲基化介导的miR-720表达抑制有助于白血病生物学特征的维持。
DNA甲基化介导的miR-720沉默与急性髓系白血病生物学特征的关系
【摘 要】
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目的 探讨miR-720在急性髓系白血病(AML)患者中的表达水平、调控机制及其与白血病肿瘤生物学行为的关系.方法 采用荧光定量PCR检测38例AML患者和20名正常对照骨髓细胞miR-720表达水平;采用焦磷酸测序法定量检测AML患者和正常对照miR-720启动子甲基化水平;构建慢病毒介导的miR-720过表达kasumi-1细胞,采用流式细胞术、WST-1法、集落形成实验、Transwell细
【机 构】
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315040宁波大学医学院附属鄞州医院血液科,315040宁波大学医学院附属鄞州医院血液科,315040宁波大学医学院附属鄞州医院血液科,315040宁波大学医学院附属鄞州医院血液科,315040宁波
【出 处】
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中华血液学杂志
【发表日期】
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2014年35期
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