【摘 要】
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目的 探讨在高糖作用下泛素蛋白酶体途径(UPP)对大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响,并用蛋白酶体抑制剂MG132为阻断剂,探讨泛素蛋白酶体途径在腹膜纤维化中的作用.方法 胰蛋白酶消化法原代和传代培养RPMC,经鉴定后第2代用于实验.随机分为对照组、不同浓度葡萄糖组(1.5％、2.5％、4.25％葡萄糖作用24 h)、
【机 构】
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110001沈阳,中国医科大学附属第一医院肾内科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院肾内科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院肾内科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院肾内科,
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目的 探讨在高糖作用下泛素蛋白酶体途径(UPP)对大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响,并用蛋白酶体抑制剂MG132为阻断剂,探讨泛素蛋白酶体途径在腹膜纤维化中的作用.方法 胰蛋白酶消化法原代和传代培养RPMC,经鉴定后第2代用于实验.随机分为对照组、不同浓度葡萄糖组(1.5％、2.5％、4.25％葡萄糖作用24 h)、高糖作用不同时间组(2.5％葡萄糖分别作用于RPMC 0、12、24、48 h)和MG132组(0.5、1、2μmol/L MG132预孵30 min后加2.5％葡萄糖作用24 h).Western印迹法检测ERK1/2蛋白的表达.ELISA法检测细胞培养上清液中CTGF蛋白的含量.结果 与对照组相比,高糖可刺激RPMC磷酸化(p)ERK1/2蛋白表达上调,24 h时达高峰(P＜0.01),48 h时下调,但仍高于正常组(P＜0.01).高糖诱导RPMC CTGF蛋白表达增高,且呈时间、剂量依赖性(P＜0.05).与高糖组相比,MG132能明显降低高糖所致的腹膜间皮细胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的表达(P＜0.05).结论 MG132可降低由葡萄糖诱导的腹膜间皮细胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的表达；泛素蛋白酶体途径参与了由高糖诱导的腹膜纤维化,阻断泛素蛋白酶体途径有利于防治腹膜纤维化。
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