探讨熊果酸(UA)对氧诱导新生小鼠视网膜病变模型新生血管形态学的影响。
方法将7日龄清洁级C57BL/6J小鼠60只采用随机数字表法随机分为6组:空白对照组、模型对照组(PBS)、阳性对照组(曲安奈德)和UA干预组(低、中、高剂量),每组10只小鼠(均取右眼,各10只眼)。空白对照组小鼠在空气中喂养,其他各组均置于体积分数(750±20) mL/L氧气(O2)的高体积分数氧环境中饲养,连续5 d。至小鼠出生12 d时将模型对照组小鼠及其哺乳母鼠返回正常空气环境(210 mL/L O2)中,以诱导小鼠视网膜新生血管产生。模型成功后,立即给予各组相应的药物治疗:模型对照组小鼠玻璃体腔注射无菌PBS 3 μL,UA干预组(低、中、高剂量)小鼠分别玻璃体腔注射1.5、3.0、6.0 μg UA各3 μL,阳性对照组小鼠玻璃体腔曲安奈德注射液(1 mL∶40 mg)3 μL。17日龄时过量麻醉处死小鼠,摘除眼球制备标本。制作视网膜组织病理切片,HE染色,计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数目;并采用视网膜铺片技术观察各组小鼠视网膜新生血管形态改变。
结果组织病理切片观察结果:空白对照组视网膜内界膜结构均一,血管内皮细胞排列整齐,偶见血管内皮细胞突破内界膜。模型对照组可见大量血管内皮细胞团突破内界膜,形成新生血管腔。不同剂量UA干预组比较,高剂量UA干预组与阳性对照组接近,可见少量血管内皮细胞突破内界膜,内界膜结构较均一,未形成或者形成新生血管腔。突破小鼠视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数比较:模型对照组明显高于空白对照组(P<0.05);高剂量UA干预组明显低于模型对照组(P<0.05);高剂量UA干预组明显低于低剂量UA干预组(P<0.05)。视网膜铺片显示:空白对照组视网膜血管自视盘向四周呈放射状均匀分布,管径较粗,分支良好,周边视网膜血管结构清晰。模型对照组视网膜大量新生血管,管径纤细,走行僵直,结构紊乱,分布不均匀,中央可见大片无灌注区。不同剂量UA干预组比较:高剂量UA干预组视网膜血管分布和走形与阳性对照组接近,较模型对照组新生血管分布明显好转,且明显较低剂量干预组的视网膜新生血管分布好,无明显的无灌注区。
结论UA抑制氧诱导小鼠视网膜新生血管的形成,且抑制效果呈剂量依赖性。