目的 观察表达Survivin基因小发卡RNA(shRNA)和内皮抑素基因(mE)的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒在体内外实验中对肝癌的抗癌活性.方法 以重组的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒感染肝癌细胞,Western blot鉴定肝癌细胞基因的蛋白表达,噻唑蓝(MTT)实验检测癌细胞增殖活性；建立肝癌裸鼠移植瘤模型,给予溶瘤腺病毒治疗,观察对移植瘤生长的抑制作用.结果 Western blot实验显示,CNHK500-shRNA-mE病毒增殖能够介导目的基因高效表达,有效抑制Survivin的表达；CNHK500-shRNA-mE感染肝癌细胞后,对肝癌细胞有特异性杀伤作用,在感染强度(MOI)=2时,CNHK.500-shRNA-mE感染组癌细胞存活率下降到50％以下,而对照病毒CNHK500-shRNA、CNHK500-mE、Ad-mE感染组癌细胞存活率均在80％左右；裸鼠SMMC-7721移植瘤模型经病毒治疗后,与对照组比较,CNHK500-shRNA-mE、CNHK500-shRNA、CNHK500-mE、Ad-mE的抑瘤率分别为77.41％ (P＜ 0.01)、59.27％ (P＜ 0.05)、35.96％ (P＜ 0.01)和25.94％ (P＜ 0.05),以CNHK500-shRNA-mE抑瘤作用最强；CNHK500-shRNA-mE介导mE和shRNA高效表达,不但能够抑制间质肿瘤血管新生[对照组血管密度(MVD)=35.6±6.2,CNHK500-shRNA-mE组MVD=11.5 ±3.8,P＜0.01],而且大量诱导癌细胞凋亡[对照组凋亡率为(5.2±1.5)％,CNHK500-shRNA-mE组凋亡率为(26.3±7.5)％,P＜0.01].结论 携带shRNA和mE的双功效溶瘤腺病毒CNHK500-shRNA-mE比任一单功效腺病毒具有更强的肿瘤抑制作用。
双调控双功效溶瘤腺病毒对肝癌的抑制作用
【摘 要】
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目的 观察表达Survivin基因小发卡RNA(shRNA)和内皮抑素基因(mE)的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒在体内外实验中对肝癌的抗癌活性.方法 以重组的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒感染肝癌细胞,Western blot鉴定肝癌细胞基因的蛋白表达,噻唑蓝(MTT)实验检测癌细胞增殖活性；建立肝癌裸鼠移植瘤模型,给予溶瘤腺病毒治疗,观察对移植瘤生长的抑制作用.结果 Western b
【机 构】
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264000青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆外科,264000青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆外科,264000青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆外科,264000青岛大学医学院附属烟台毓璜
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2013年30期
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