目的 观察表达Survivin基因小发卡RNA(shRNA)和内皮抑素基因(mE)的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒在体内外实验中对肝癌的抗癌活性.方法 以重组的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒感染肝癌细胞,Western blot鉴定肝癌细胞基因的蛋白表达,噻唑蓝(MTT)实验检测癌细胞增殖活性;建立肝癌裸鼠移植瘤模型,给予溶瘤腺病毒治疗,观察对移植瘤生长的抑制作用.结果 Western blot实验显示,CNHK500-shRNA-mE病毒增殖能够介导目的基因高效表达,有效抑制Survivin的表达;CNHK500-shRNA-mE感染肝癌细胞后,对肝癌细胞有特异性杀伤作用,在感染强度(MOI)=2时,CNHK.500-shRNA-mE感染组癌细胞存活率下降到50%以下,而对照病毒CNHK500-shRNA、CNHK500-mE、Ad-mE感染组癌细胞存活率均在80%左右;裸鼠SMMC-7721移植瘤模型经病毒治疗后,与对照组比较,CNHK500-shRNA-mE、CNHK500-shRNA、CNHK500-mE、Ad-mE的抑瘤率分别为77.41% (P< 0.01)、59.27% (P< 0.05)、35.96% (P< 0.01)和25.94% (P< 0.05),以CNHK500-shRNA-mE抑瘤作用最强;CNHK500-shRNA-mE介导mE和shRNA高效表达,不但能够抑制间质肿瘤血管新生[对照组血管密度(MVD)=35.6±6.2,CNHK500-shRNA-mE组MVD=11.5 ±3.8,P<0.01],而且大量诱导癌细胞凋亡[对照组凋亡率为(5.2±1.5)%,CNHK500-shRNA-mE组凋亡率为(26.3±7.5)%,P<0.01].结论 携带shRNA和mE的双功效溶瘤腺病毒CNHK500-shRNA-mE比任一单功效腺病毒具有更强的肿瘤抑制作用。
双调控双功效溶瘤腺病毒对肝癌的抑制作用
【摘 要】
:
目的 观察表达Survivin基因小发卡RNA(shRNA)和内皮抑素基因(mE)的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒在体内外实验中对肝癌的抗癌活性.方法 以重组的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒感染肝癌细胞,Western blot鉴定肝癌细胞基因的蛋白表达,噻唑蓝(MTT)实验检测癌细胞增殖活性;建立肝癌裸鼠移植瘤模型,给予溶瘤腺病毒治疗,观察对移植瘤生长的抑制作用.结果 Western b
【机 构】
:
264000青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆外科,264000青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆外科,264000青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院肝胆外科,264000青岛大学医学院附属烟台毓璜
【出 处】
:
中华实验外科杂志
【发表日期】
:
2013年30期
论文部分内容阅读
其他文献
目的 观察在拉伸应力作用下,细胞骨架(CSK)破坏剂和膜离子通道阻滞剂对体外培养兔膝关节软骨细胞代谢的影响.方法 2月龄新西兰大白兔10只,无菌条件下剖取双膝,并将其消化为软骨细胞,并随机分为8组,即对照组,微管、微丝、中间纤维破坏组,Na+、K+、Ca2+、Cl-通道阻滞组.在拉伸应力作用下干预3d后,苏木素-伊红(HE)染色观察其形态.采用酶联免疫吸附试验(ELASA)和阿尔新蓝染色检测各组标
急性放射性肠炎是腹盆腔部肿瘤放射治疗后引起的小肠和结肠损伤,可导致肠腺细胞再生受阻,绒毛破坏,导致毒血症,后果严重,临床治疗棘手[1].我们使用放射诱导的大鼠肠损伤模型,观察凉血愈肠汤对于肠上皮细胞增殖的影响.一、材料和方法1.材料:体质量220 ~ 250 g的雄性SD大鼠购于北京华阜康生物科技公司.凉血愈肠汤来自第二炮兵总医院中药房,超敏链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)试剂盒购自福州迈新
期刊
目的 观察RNA干扰沉默B细胞特异性莫洛尼白血病病毒插入位点1(Bmi-1)基因对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响.方法 PC-3细胞随机分为3组,分别转染Bmi-1靶序列干扰RNA (Bmi-1-siRNA)、无义对照siRNA、空白脂质体.48 h后收集细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测Bmi-1 mRNA和蛋白表达水平.96孔板噻唑蓝(MTT)法检测
目的 观察肝癌细胞株HepG2自身分泌的白细胞介素-6(IL-6)对其增殖能力和细胞周期的影响.方法 RNA干扰技术沉默IL-6基因,同时设空白对照组(不加转染试剂)、正常对照组(转染空脂质体)、无义对照组[转染无义对照小干扰RNA(siRNA)],实验对照组(转染沉默IL-6的siRNA).噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖能力,用流式细胞技术检测细胞的生长周期.结果 逆转录-聚合酶链反应(R
目的 探讨男性解脲支原体(UU)感染对精子质量的影响.方法 随机选取83例UU阳性的不育症患者,比较治疗前与治愈后的精液质量、正常精子形态率的差异.结果 治愈后的精液液化时间为(33.37±14.25) min、精子密度为(77.38±66.19)×106/ml、成活率为(52.37±18.80)%、活力为(39.39±16.00)%,均有所改善,但差异无统计学意义(P>0.05);治愈后的精子形
目的 应用血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)腹腔注射建立小鼠主动脉夹层模型.方法 8月龄C57BL/6J小鼠40只,雌雄不拘,随机分为2组.实验组20只,每8h腹腔注射血管紧张素Ⅱ,剂量为每天4.5 mg/kg;对照组20只,每8h腹腔注射去甲肾上腺素,剂量为每天12 mg/kg.分别于注射30 min后应用鼠尾测压器检测并记录小鼠血压(收缩压).精心饲养14 d,中途死亡小鼠直接解剖,取出主动脉.14
目的 观察Nelin对血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的影响.方法 血清饥饿诱导VSMC由合成型向收缩型转变,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测不同表型VSMC的Nelin mRNA表达水平;转染Nelin-小干扰RNA(siRNA)沉默Nelin的表达,应用考马斯亮蓝染色法、乙酰胆碱(Ach)刺激法观察VSMC细胞骨架和收缩功能的变化.结果 Nelin mRNA在血清刺激组与血清
目的 观察细胞外信号调节激酶(ERK)信号传导通路在乙肝病毒X基因(HBx)改变肝癌细胞HepG2对顺铂敏感性中的作用.方法 采用聚合酶链反应(PCR)法从pCP10质粒中扩增482 bp HBx的开放读码框(ORF),构建表达载体pcDNA3-HBx并进行酶切及测序鉴定.应用脂质体将其转染HepG2,50 mg/L G418筛选阳性克隆,抽提mRNA,逆转录(RT)-PCR鉴定是否稳定表达HBx
目的 探讨骨质疏松性椎体压缩性骨折经皮椎体成形术(PVP)术后再发骨折的治疗方法.方法 2010年1月至2012年12月,收治骨质疏松性椎体压缩性骨折PVP术后再发骨折患者43例,再次行PVP治疗,术前及术后进行视觉模拟疼痛评分(VAS)及自理生活能力评估(ADL).结果 所有患者采用PVP治疗均获成功,影像学并发症包括骨水泥漏入椎间盘、周围软组织、椎体周围静脉引流,但上述患者均无明显的临床症状,