【摘 要】
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背景与目的：甲基转移酶Wilms瘤1-相关蛋白（Wilms’ tumor 1-associating protein,WTAP）被证实在肿瘤中发挥重要作用，本研究旨在从N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine,m6A）修饰的角度探讨WTAP在胶质瘤发生、发展过程中的作用及其机制。方法：通过芯片筛选胶质瘤中差异表达的m6A调节因子，采用实时荧光定量聚合酶链反应（realtime fluo
【基金项目】
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河北省医学科学研究重点课题计划项目（20171165）；
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背景与目的：甲基转移酶Wilms瘤1-相关蛋白（Wilms’ tumor 1-associating protein,WTAP）被证实在肿瘤中发挥重要作用，本研究旨在从N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine,m6A）修饰的角度探讨WTAP在胶质瘤发生、发展过程中的作用及其机制。方法：通过芯片筛选胶质瘤中差异表达的m6A调节因子，采用实时荧光定量聚合酶链反应（realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）评估WTAP/B细胞特异性莫洛尼氏鼠白血病病毒整合位点1（B cell-specific Moloney murine leukemia virus integration site 1,BMI1）在胶质瘤组织和细胞系中的表达。借助四甲基偶氮唑盐（methyl thiazoyl terazolium,MTT）探究WTAP/BMI1对胶质瘤细胞增殖的作用。采用细胞外酸化率（extracellular acidification rate,ECAR）试剂盒、葡萄糖消耗及乳酸生成检测试剂盒评估胶质瘤细胞有氧糖酵解情况。结果：相对于正常组织，WTAP、BMI1在胶质瘤组织中表达上调。此外，相对于HEB细胞中的WTAP（1.01±0.13）和BMI1（1.02±0.11）表达，U251细胞中的WTAP（2.38±0.17）、BMI1（2.25±0.14）表达增强（P均＜0.05）。敲减WTAP在体外能抑制细胞增殖和糖酵解能力，而过表达WTAP则显示相反效果。过表达WTAP对胶质瘤细胞增殖、糖酵解的作用能被敲减BMI1部分挽救（P均＜0.05）。在机制上，WTAP促进BMI1的m6A甲基化修饰，使BMI1mRNA的稳定性增强（P均＜0.05）。结论：WTAP能以m6A甲基化依赖方式促进BMI1表达，从而促进胶质瘤细胞增殖和有氧糖酵解，靶向WTAP的分子治疗手段可能为改善胶质瘤治疗效果提供新方向。
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