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目的 构建载有白细胞介素-10(IL-10)基因的,能在肝星状细胞(HSC)稳定表达的重组腺病毒载体,为将来的肝纤维化基因治疗提供基础.方法将IL-10cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒PAdTrack-CMV,得到重组质粒PadTrack-CMV-IL-10.采用电穿孔法将质粒PadTrack-CMV-IL-10与腺病毒骨架质粒PadEasy-1共转化E.coliBJ5183细胞,通过在细胞内同源重组,生成带有IL-10基因的重组腺病毒载体.重组腺病毒质粒经过293细胞的扩增及CsCl的纯化,感染HSC细胞.结果经形态学、病毒DNA酶切、聚合酶链反应(PCR)和逆转录(RT)-PCR等方法的鉴定,证实了载体构建的正确性,经测定,病毒滴度为2.5×1010efu/ml.结论成功构建带有IL-10cDNA的重组腺病毒载体,所携带的IL-10载体能够转染大鼠HSC并在HSC中稳定表达,为进一步的研究打下了基础。