【摘 要】
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目的 观察缺血性脑卒中(CIS)模型大鼠炎症反应及大脑皮层组织微小RNA(miR)-181a和锌指E盒结合同源框(ZEB)1蛋白水平变化情况,探讨miR-181a调控ZEB1对炎症反应的作用机制。方法 将36只SD大鼠随机分为对照组、假伤组和模型组,雌雄各半,每组12只。模型组建立CIS模型,假伤组行假伤手术,对照组不做任何干预。取小胶质细胞(BV2)培养,分别转染miRNA Negtive Co
【基金项目】
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海南省重点研发计划项目(ZDYF2019176);
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目的 观察缺血性脑卒中(CIS)模型大鼠炎症反应及大脑皮层组织微小RNA(miR)-181a和锌指E盒结合同源框(ZEB)1蛋白水平变化情况,探讨miR-181a调控ZEB1对炎症反应的作用机制。方法 将36只SD大鼠随机分为对照组、假伤组和模型组,雌雄各半,每组12只。模型组建立CIS模型,假伤组行假伤手术,对照组不做任何干预。取小胶质细胞(BV2)培养,分别转染miRNA Negtive Control(空白对照组)、miR-181a inhibitor(抑制表达组)和hsa-miR-181a(促进表达组)。采用免疫比浊法检测大鼠血清C反应蛋白(CRP)表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平。RT-PCR检测大鼠大脑皮层组织和转染细胞miR-181a和ZEB1 mRNA表达量,Western印迹检测大脑皮层组织和转染细胞ZEB1表达量。结果 与对照组比较,假伤组和模型组超敏(hs)-CPR、IL-6和TNF-α表达水平均明显升高(均P<0.05);且模型组均明显高于假伤组(均P<0.05)。与对照组和假伤组比较,模型组miR-181a、ZEB1蛋白及mRNA相对表达量均明显升高(均P<0.05)。模型组血清hs-CPR、IL-6和TNF-α表达与miR-181a相对表达量呈正相关,与ZEB1蛋白及mRNA相对表达量呈负相关(P<0.05,P<0.001)。与空白对照组比较,抑制表达组转染细胞miR-181a相对表达量明显下降,ZEB1蛋白及mRNA相对表达量均明显升高(均P<0.05);促进表达组miR-181a相对表达量明显升高,ZEB1蛋白及mRNA相对表达量均明显下降(均P<0.05)。结论 miR-181a可能通过调控小胶质细胞ZEB1表达而影响CIS模型炎症反应。
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