【摘 要】
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通过双酶切方法将重组质粒上大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶（PNPase）基因克隆到pBV220表达载体上,构建了温敏型PNPase的表达载体pBV 220-PNP,转化大肠杆菌DH5α并使之表达.SDS-PAGE
【机 构】
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复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室,上海水产大学食品学院
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通过双酶切方法将重组质粒上大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶（PNPase）基因克隆到pBV220表达载体上,构建了温敏型PNPase的表达载体pBV 220-PNP,转化大肠杆菌DH5α并使之表达.SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异表达条带,其分子量约为26 kDa.在此基础上研究了不同诱导条件对蛋白表达量的影响.分别以肌苷和尿苷为核糖供体研究重组菌转化腺苷的条件,发现肌苷最适合作为核糖供体,在30 mmol·L^-1pH 7.5的Na2HPO4-KH2PO4缓冲液中,以30 mmol·
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