电针对颅脑损伤大鼠神经功能及凋亡相关蛋白Cyt-C、Caspase-9表达的影响

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目的:观察电针对颅脑损伤(TBI)大鼠神经功能、脑组织病理形态、细胞凋亡水平及凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt-C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)表达的影响,探索电针治疗TBI的可能机制.方法:将70只清洁级SD大鼠随机分为空白组(8只)、假手术组(8只)、模型组(27只)和电针组(27只).模型组及电针组再按干预3、7、14 d分为3个亚组,每亚组9只,并采用改良式Feeney自由落体法制备大鼠TBI模型;假手术组仅暴露颅骨、钻孔,不行自由落体打击.于造模后1 d对电针组大鼠行电针干预,穴取“百会”“水沟”及患侧“内关”“足三里”,断续波,频率2 Hz,每天1次,每次10 min,分别干预3、7、14 d.分别于干预3、7、14 d采用改良神经功能缺损量表(mNSS)评定各组大鼠神经功能损伤程度;HE染色法和尼氏染色法观察脑组织病理形态改变;TUNEL法观察脑组织细胞凋亡水平;免疫组织化学法、Western blot法检测脑组织Cyt-C、Caspase-9蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠干预3、7、14 d时mNSS评分均明显升高(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠干预3、7、14 d时mNSS评分均降低(P<0.05).干预3 d时模型组及电针组大鼠脑损伤区域均可见组织坏死,核破碎、固缩及明显空泡,尼氏体减少、分布松散;干预7、14 d时模型组及电针组均可见新生结缔组织填充和正常细胞,尼氏体增加,且电针组整体修复情况、尼氏体数量优于模型组.与假手术组比较,模型组大鼠干预3、7、14 d时脑组织凋亡细胞数均明显增多(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠干预3、7、14 d时脑组织凋亡细胞数均减少(P<0.05).与假手术组比较,模型组大鼠干预3、7、14 d时损伤脑组织Cyt-C、Caspase-9蛋白表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠干预3、7、14 d时损伤脑组织Cyt-C、Caspase-9蛋白表达均降低(P<0.05).结论:电针可明显改善TBI模型大鼠神经功能损伤情况,降低细胞凋亡水平,其机制可能与下调损伤脑组织中Cyt-C、Caspase-9蛋白表达,进而影响线粒体介导的细胞凋亡进程有关.
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