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采用同源重组法制备钾离子转运蛋白基因TRK／和TRK2缺失的酿酒酵母钾营养缺陷型。通过RNA反转录PCR方法从拟南芥幼根扩增获得片段长度为2139bp的AtKupl基因，以此片段为膜板，采用DNA重排技术，经DNaseI降解，PrimerlessPCR和PrimerPCR建立AtKupl基因突变库。将突变库和未经DNA重排处理的AtKupl基因分别构建酵母穿梭载体，并导入K^＋转运蛋白基因TRKl和TRK2缺失的酿酒酵母中，分别在低钾（5．0mmol／LKCI）不合色氨酸的培养基上筛选转化子，从突变基因库