【摘 要】
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目的建立测定人血浆中双氢可待因浓度的高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,选用安捷伦色谱柱XDB-C18,2.1×50 mm,5μm梯度洗脱。流动相A为0.1%甲
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目的建立测定人血浆中双氢可待因浓度的高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,选用安捷伦色谱柱XDB-C18,2.1×50 mm,5μm梯度洗脱。流动相A为0.1%甲酸10 mM甲酸铵水溶液,流动相B为0.1%甲酸甲醇。流动性梯度为0 min(B 5%)→1 min(B 5%)→1.3(B 65%)→2.4 min(B 65%)→2.5 min(B 5%)→3.5 min(B 5%)。流速0.6 mL/min,柱温30℃,自动进样器温度4℃,进样量10μL。选用岛津LC-20A高效液相色谱系统和串联API4000 Qtrap型三重四极杆质谱仪,ESI源正离子MRM扫描,IS电压5500 V,CAD气Medium,CUR气40 psi,Gas1:35 psi,Gas2:40 psi,源温度550℃,EP电压10 V,CXP电压9 V。双氢可待因:m/z 302.1→199.1,DP电压:105 V,CE电压:47 V。右美沙芬(内标):m/z 271.3→170.1,DP电压100 V,CE电压54 V。结果该方法测定血浆中二氢可待因的线性范围为2~1 000 ng/mL(r>0.99),定量下限为2 ng/mL,准确度均在85%~115%,批内和批间精密度也均<15%。稳定性试验中,血浆样品及血浆经处理后样品中的双氢可待因在方法学要求的各种贮存条件下均比较稳定。结论该方法简单、快速、灵敏、专属性强、重现性好,适用于检测人血浆中双氢可待因浓度的研究。
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