【摘 要】
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目的探讨JAK/STAT3介导的信号途径在苦参碱对K562细胞增殖抑制作用中的分子机制。方法以不同浓度苦参碱处理K562细胞，Western blot法分析JAK/STAT3通路分子JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白表达的改变；荧光实时定量RT-PCR及Western blot法分析STAT3下游调控基因Bcl-xL、Cyclin D1、c-Myc的表达；荧光实时定量RT-PCR及ELISA法检测
【机 构】
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213000 常州，南京医科大学附属常州市第二人民医院中心实验室,213000 常州，南京医科大学附属常州市第二人民医院中心实验室,213000 常州，南京医科大学附属常州市第二人民医院中心实验室,2
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目的探讨JAK/STAT3介导的信号途径在苦参碱对K562细胞增殖抑制作用中的分子机制。
方法以不同浓度苦参碱处理K562细胞，Western blot法分析JAK/STAT3通路分子JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白表达的改变；荧光实时定量RT-PCR及Western blot法分析STAT3下游调控基因Bcl-xL、Cyclin D1、c-Myc的表达；荧光实时定量RT-PCR及ELISA法检测K562细胞IL-6表达的改变。以IL-6预处理K562细胞，Western blot法分析苦参碱对细胞内JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白表达的作用。
结果0.5 mg/ml苦参碱处理48 h, K562细胞内STAT3及JAK2总蛋白表达无明显变化，磷酸化STAT3(p-Tyr705 STAT3、p-Ser727 STAT3)和磷酸化JAK2 (p-JAK2）表达水平分别由处理前的0.690± 0.119、1.150±0.263和0.670±0.137下降至0.370±0.024、0.700±0.172和0.049±0.057。苦参碱对STAT3下游调控基因Bcl-xL、Cyclin D1及c-Myc的转录及蛋白表达均有抑制作用，并可显著抑制IL-6的表达和分泌，0.5和0.8 mg/ml苦参碱处理后细胞培养上清中IL-6浓度分别为(10.74±1.83) pg/ml和(8.66± 1.24) pg/ml，较处理前[(35.1±1.93) pg/ml]显著降低(P<0.05)。IL-6预处理K562细胞后，STAT3、JAK2、p-STAT3及p-JAK2表达均有增加，苦参碱可抑制IL-6对上述分子表达的上调。
结论苦参碱抑制K562细胞增殖与JAK/STAT3介导的信号通路抑制有关，IL-6表达抑制可能是苦参碱调控JAK/STAT3通路活性的始动机制。
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