【摘 要】
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捻转血矛线虫病由捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)寄生于反刍动物皱胃之中引起.为探究捻转血矛线虫锌金属蛋白酶NAS-31基因(Hc-nas-31)在虫体自由生活时期(特别是3期幼虫)中发挥的功能,本研究通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测目的基因在捻转血矛线虫各发育阶段的转录水平,利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,R
【机 构】
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浙江大学动物科学学院动物预防医学研究所,杭州 310058
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捻转血矛线虫病由捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)寄生于反刍动物皱胃之中引起.为探究捻转血矛线虫锌金属蛋白酶NAS-31基因(Hc-nas-31)在虫体自由生活时期(特别是3期幼虫)中发挥的功能,本研究通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测目的基因在捻转血矛线虫各发育阶段的转录水平,利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)、基因步移及融合PCR方法扩增并分析其基因结构;构建原核表达载体后转化至BL21感受态细胞中进行诱导表达;将纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体;通过虫体间接免疫荧光分析Hc-NAS-31在捻转血矛线虫体内的表达特性并预测其功能.结果表明:Hc-nas-31在各时期虫体中均有转录,其中在3期幼虫中的转录水平最高;蛋白质印迹结果显示,制备的抗体能特异性结合Hc-NAS-31天然蛋白;间接免疫荧光分析发现,Hc-NAS-31蛋白主要表达于3期幼虫的上皮细胞合胞体内,在成虫中则分布于肠道、生殖腺(性腺)、肌肉组织及早期虫卵中.本实验明确了NAS-31在捻转血矛线虫中的表达特性,为进一步研究Hc-nas-31的生物学功能奠定了基础.
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本研究针对曝气方式各异的A(底部曝气)、B(中心曝气)、C(四周曝气)3套堆肥反应器,在空载状态下考察了外环境温度、曝气速率、曝气部位和搅拌操作对堆肥反应器内部温度场分布的影响,并通过负载模拟物料试验进行验证.结果表明:供试的4种条件均会对内部温度场分布产生明显影响,尤其是外环境温度的变化会加大反应器内温度差.当曝气速率为0.75 m3/h时,供试的3套反应器内部温度场分布较均匀,但C反应器温度场优于A和B反应器.综合来看,0.75 m3/h的曝气速率、四周曝气是较利于温度场分布的曝气策略.本研究通过优化
为了解析并纯化不同种类柑橘的主要抗氧化活性物质,比较不同品种柑橘提取物的抗氧化活性,选取\'玉环文旦\'(柚类)、\'胡柚\'(葡萄柚类)、\'伦晚脐橙\'(甜橙类)、\'代代\'(酸橙类)、\'椪柑\'(橘类)和\'瓯柑\'(柑类)等代表性品种,建立各品种主要抗氧化物质的分段分离方法和高纯度纯化体系,并对从中提取的分别富含黄酮、黄烷酮及多甲氧基黄酮的3个分段产物和15个纯化单体进行体外化学抗氧化能力评价.结果表明:6个柑橘品种的不同分段产物及纯化单体的化学
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猪肚菌(Clitocybe maxima)是一种风味独特的珍贵高温食用菌.本实验以新鲜猪肚菌为原料,通过对基本营养成分及矿物质含量的检测,探究并评价猪肚菌的菌伞、菌柄和菌根部位的食用价值.基于电子舌、电子鼻和气相色谱-离子迁移谱(gas chromatography-ion mobility spectroscopy,GC-IMS)评价猪肚菌不同部位的滋味和气味差异,为猪肚菌风味研究提供实验与理论支撑.结果表明:猪肚菌菌伞的水分、脂肪、蛋白质含量较高,菌柄总糖含量最多,菌伞的氨基酸组成最符合联合国粮农组织
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