黑翅土白蚁ISSR-PCR体系的建立与优化

来源 :安徽农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jakey17866747
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采用单因子梯度优化的方法,对已初步建立的黑翅土白蚁ISSR-PCR的反应体系在dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度、模板量及TaqDNA聚合酶用量等方面进行了优化。结果表明,适用于黑翅土白蚁的ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为:dNTPs 0.2 mmol·L-1,Mg2+3.0 mmol·L-1,引物浓度0.4μmol·L-1,模板用量DNA 20 ng,TaqDNA聚合酶2.5 U。 The single-factor gradient optimization method was used to optimize the ISSR-PCR reaction system of terrestrial termites, the dNTPs, Mg2 + concentration, primer concentration, template amount and Taq DNA polymerase. The results showed that the best concentration of ISSR-PCR reaction system for termites was: dNTPs 0.2 mmol·L-1, Mg2 + 3.0 mmol·L-1, primer 0.4 μmol·L-1 , 20 ng of template DNA and 2.5 U of Taq DNA polymerase.
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