【摘 要】
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为获得牛结节性皮肤病病毒（LSDV）p32可溶性蛋白并制备其多克隆抗体，截取了LSDV的P32基因膜外区序列，并构建了重组表达质粒pColdⅠ-P32,在大肠埃希氏菌BL21（DE3） pLysS细胞中经低温诱导表达，然后用钴离子亲和层析纯化以可溶性形式表达的重组蛋白，使用纯化的p32截短蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体，并通过Western blot鉴定。结果表明，成功使用钴离子亲和层析纯化获得L
【基金项目】
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广州市基础与应用基础研究项目（202201011182）； 广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金项目（2022KJ119,2022KJ114）； 广东省农业科学院“十四五”学科团队项目（202122TD）；
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为获得牛结节性皮肤病病毒（LSDV）p32可溶性蛋白并制备其多克隆抗体，截取了LSDV的P32基因膜外区序列，并构建了重组表达质粒pColdⅠ-P32,在大肠埃希氏菌BL21（DE3） pLysS细胞中经低温诱导表达，然后用钴离子亲和层析纯化以可溶性形式表达的重组蛋白，使用纯化的p32截短蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体，并通过Western blot鉴定。结果表明，成功使用钴离子亲和层析纯化获得LSDV p32可溶性膜外区蛋白，制备的多克隆抗体可以特异性识别LSDV感染的牛组织蛋白。获得的纯度较高的LSDV p32截短蛋白和特异性良好的多克隆抗体，为建立LSDV抗原检测方法及亚单位疫苗的研制奠定了基础。
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