【摘 要】
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目的:建立先天性牙根发育不全疾病患儿与其正常兄弟间致病差异表达基因的cDNA文库.方法:采用改良消减杂交技术,以先天性牙根发育不全疾病患儿与其正常兄弟外周静脉血的总mRNA
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院儿童口腔科,第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室,第四军医大学口腔医学院生物化学与分子生物学教研室
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目的:建立先天性牙根发育不全疾病患儿与其正常兄弟间致病差异表达基因的cDNA文库.方法:采用改良消减杂交技术,以先天性牙根发育不全疾病患儿与其正常兄弟外周静脉血的总mRNA为对比材料,筛选出候选相关致病基因差异表达的cDNA,将其与pGEM-T载体进行T/A连接构建文库,然后转化高效感受态大肠杆菌进行文库扩增,随机挑取100个白色克隆进行酶切鉴定.结果:扩增消减cDNA文库获得400余个白色阳性克隆,随机挑取的100个白色克隆经酶切后90%有插入片段.结论:用改良消减杂交技术成功构建了先天性牙根发育不全疾病致病差异表达基因的消减cDNA文库,该文库的建立为进一步筛选、克隆该疾病的候选致病相关基因奠定了基础.
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