重组质粒βhCG-pPIC9K的构建及嗜甲醇酵母(Pichiapastoris)的转化

来源 :暨南大学学报:自然科学与医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jingqihao
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目的:为用基因重组技术表达hCG避孕疫苗抗原,构建在酵母细胞中表达的重组质粒βhCG-pPIC9K,转化嗜甲醇酵母,方法:根据βhCG的cDNA序列设计两条引物,使上游带EcoRⅠ酶切位点,下游带NotⅠ酶切位点,以质粒βhCG-PBSKS为模板,进行PCR扩增反应;将所得的DNA片段经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后用T4连接酶与pPIC9K质粒进行连接,然后导入大肠杆菌DH5α,用PCR筛选阳性克
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