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基于中药复方网络药理学方法探讨二黄汤(Erhuang decoction,EhD)治疗急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的多成分-多靶点-多通路作用机制.以EhD体内入血成分为研究对象,利用SwissTargetPrediction、DisGeNET、Therapeutic Target Database(TTD)、GeneCards、Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM)等数据库预测成分潜在作用靶点,并与ALI疾病预测靶点交集整合,获得二黄汤治疗ALI的潜在靶点.利用String数据库和Cytoscape软件进行蛋白相互作用(protein-protein interaction network,PPI)网络构建;利用DAVID平台进行基因本体论(Gene Ontology,GO)分析和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路注释;应用Cytoscape软件构建“入血成分-靶点-通路”网络;采用Swissdock在线平台对入血成分与关键靶点进行分子对接.建立小鼠ALI模型,进行肺组织切片、炎症因子检测和Western blot蛋白表达实验,验证EhD对ALI治疗效果.动物实验获得山东大学实验动物中心伦理委员会的批准(批准号:2016020).结果发现信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial cell growth factor A,VEGFA)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase,AKT1)、核转录因子-κB/p65(nuclear factor-kappaB/p65,RELA)等关键靶点148个,主要涉及炎症、氧化应激和细胞凋亡等生物过程,与癌症通路、VEGF信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路、Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)信号通路等通路相关.药效实验显示,EhD能显著降低ALI小鼠炎症因子含量、降低肺损伤程度.Western blot实验显示,EhD能显著下调NF-κB/p65表达,上调核转录因子抑制剂(NF-kappa B inhibitor alpha,IκBα)的表达.本研究从网络药理学的角度初步揭示了EhD治疗ALI的多成分、多靶点和多通路的作用机制,为中药复方作用机制研究提供借鉴.