【摘 要】
：
目的选取弓形虫基因组中高度保守的多拷贝基因529bp重复序列、ITS-1序列和B1基因作为real-timePCR检测的靶基因,建立检测弓形虫的三重SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR的检测方法
【机 构】
：
福建农林大学动物科学学院,福建省动物药物工程实验室; 龙岩学院生命科学学院;
【基金项目】
：
福建省科技厅省属高校项目(JK2011052)资助~~
论文部分内容阅读
目的选取弓形虫基因组中高度保守的多拷贝基因529bp重复序列、ITS-1序列和B1基因作为real-timePCR检测的靶基因,建立检测弓形虫的三重SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR的检测方法并且与ELISA检测方法进行比较。方法将529bp重复序列、B1基因、ITS-1序列的选定扩增序列进行克隆、测序构建标准品;将构建的3个标准品放在一个体系中进行扩增,进行三重SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR。结果 529bp、ITS-1和B1的标准曲线的相关系数(R2)均为0.998,并且扩增效率均为96.724%,扩增片段的Tm值分别为86.5±0.5℃、78.8±0.5℃、83.1±0.5℃;构建的三重SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR特异性试验表明,529bp、ITS-1和B1有特异性的溶解曲线峰值分别是86.2℃、78.9℃和83.3℃,阴性对照无扩增曲线;敏感性试验表明,529bp、ITS-1和B1序列最低检出限分别为173copies/μL、123copies/μL、和135copies/μL;Tm值的批内、批间重复试验的变异系数均小于0.13%;ELISA检测猪弓形虫IgG抗体的阳性率41.72%,ELISA与荧光定量PCR检测核酸阳性符合率为53.44%(P<0.01)。结论建立弓形虫三重SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测技术具有高特异性和敏感性,可为临床弓形虫的诊断提供科学依据
其他文献
在油气开采过程中,油井出砂具有很大的危害性,轻者可以影响油井的正常生产,重者可以使油井报废。因此,防砂治理在油井的开发过程中起着尤为重要的作用。压裂防砂作为一项主要
在物元分析的基础上,介绍了多目标决策的模糊物元分析,并给出了实例,为多目标决策提供了新的思路.
颜色是人类重要的认知对象和范畴。人们常将颜色转到对其他事物的认知与表达上。同样,颜色也被用于修饰人体。人体被哪些色彩词修饰、传递何种情感或产生什么样的修辞意义,不
<正>2月10日,自治区党委书记、自治区新冠肺炎疫情防控工作领导小组组长鹿心社先后到机关单位、医院和企业,实地检查指导新冠肺炎疫情防控工作和企业复工复产情况。他强调,全
替米考星(TLM)作为一种新型的大环内酯类抗生素,抗菌谱广,抑菌浓度低,体积分布广,已被广泛应用于预防和治疗猪、鸡、牛等动物的呼吸道感染性疾病及乳房炎。但TLM的味道极苦,
<正>白马涧生态园位于苏州高新区枫桥街道西部,是苏州西部旅游区的重要组成部分,占地7平方公里,是高新区的一块原生态"绿肺"。白马涧生态园离市中心16公里,区域位置优越、交
为改善大学计算机基础教学的教学效果,文章提出了以计算思维能力培养为导向的MOOC支持的线上线下混合教学模式,对MOOC支持的线上线下混合教学平台的建设和线上线下混合教学活
抗美援朝战争第二次战役中,志愿军第40军与第38军密切配合,给美军第2师以歼灭性打击。但目前已公开的交战双方史料对此次战役中美军第2师被歼人数的记载有很大不同,尤其是第4
水生真菌(Aquatic fungi)是指整个生活周期或部分生活周期依赖于水环境的真菌。水生真菌在物质循环和碳循环、水生生态系统动力学中都起着重要作用,它能分解和软化水体中的木
19世纪末20世纪初是美国社会的转型时期。世纪更迭之际,美国实现了工业化、城市化,与此同时,各种矛盾和社会问题也集中地暴露出来。工业化和城市化使得妇女的就业机会在这一