【摘 要】
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目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的A549细胞凋亡中核转录因子-κB(NF-κB)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)信号通路的作用.方法(1)以浓度为0.00、0.25、0.50和
【机 构】
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郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室,河南 郑州450001
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目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的A549细胞凋亡中核转录因子-κB(NF-κB)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)信号通路的作用.方法(1)以浓度为0.00、0.25、0.50和1.00 nmol/L的TNF-α刺激A549细胞,采用CCK-8实验检测细胞存活率,筛选TNF-α的最优刺激剂量.(2)取对数生长期A549细胞随机分为4组,对照组、TNF-α组、BAY11-7082(NF-κB抑制剂)组和TNF-α+BAY11-7082组.对照组细胞不予任何处理;TNF-α组和BAY11-7082组分别予浓度为0.50 nmol/L的TNF-α和浓度为5μmol/L的BAY11-7082刺激;TNF-α+BAY11-7082组细胞先后加入上述浓度的TNF-α和BAY11-7082刺激.培养24 h后,采用CCK-8实验检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测NF-κB(p65)和NOX1蛋白的相对表达水平.结果(1)以浓度为0.50 nmol/L的TNF-α刺激A549细胞时,可降低其增殖活性并促进细胞的凋亡,选择该浓度作为后续实验的TNF-α刺激剂量.(2)与对照组比较,TNF-α组A549细胞存活率下降(P<0.05),细胞凋亡率和NF-κB(p65)、NOX1蛋白的表达均升高(P值均<0.05).与对照组比较,BAY11-7082组A549细胞存活率和NF-κB(p65)、NOX1相对表达水平均下降(P值均<0.05),细胞凋亡率均升高(P<0.05).与TNF-α组比较,TNF-α+BAY11-7082组A549细胞由长梭形变为不规则形,细胞存活率升高(P<0.05),细胞凋亡率和NF-κB(p65)、NOX1相对表达水平均下降(P值均<0.05).结论 NF-κB/NOX1信号通路参与了TNF-α诱导的A549细胞凋亡.
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