白芨组培繁殖技术研究

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  摘 要:通过对种子成熟度、增殖、生根生长的研究,本试验得出用于诱导最佳类型的种子为类型1种子,最佳的增殖培养基为MS+6BA1.0mg/L+NAA0.6mg/L+香蕉35g/L+马铃薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L,最适合的生根培养基为MS+NAA0.8mg/L+香蕉35g/L+马铃薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L。
  关键词:白芨;药材;组织培养;试验
  中图分类号:S567.23+9 文献标识码:A 文章编号:1004-7344(2018)36-0204-02
  白芨为一种典型的兰科白芨属多年生草本植物。它的野生资源广泛分布于东亚地区、朝鲜半岛、日本、中国云南等地。白芨药用价值高,对消肿生肌、收敛止血具有较好的功效,且白芨含有的部分化学物质对结核杆菌、癌细胞的生长分裂均具有较好的抑制作用。它作为一种常见的名贵中药,白芨备受中医界各学者的关注,但由于白芨自然繁殖率低,为了满足市场对白芨的需求,且从培育成本方面进行考虑,通过对白芨种子的选取及培养基的筛选试验,以达到最佳繁殖效果。
  1 材料与方法
  材料来源于人工种植白芨的未开裂蒴果。
  1.1 材料选取(略)
  1.2 种子消毒
  超净工作台上,根据外观颜色、饱满度,把种子分成类型1种子即种皮黄色而不破裂和类型2种子即种皮青而饱满两类。然后用无菌水分别对两类种子进行冲洗3次,再用75%酒精对种子进行浸泡20s,用无菌水冲洗3次后,再用0.2%升汞消毒20min和15min,最后再用无菌水冲洗3~6次,消毒好的种子待用。
  1.3 试验方法
  1.3.1 不同成熟度的种子对生长的影响
  把类型1和类型2两种种子进行消毒后,接入以MS为基础培养基,设6BA1.0mg/L,NAA0.6mg/L,添加香蕉35g/L,马铃薯40g/L,活性炭0.5g/L,白糖30kg/L,pH值为5.8的培养基中,接种密度以种子铺满培养基80%为宜。每类型的种子接种培养基50瓶,培养温度均为25±1℃,60d后进行结果统计。
  1.3.2 不同的激素配比对其增殖生长的影响
  以MS为基础培养基,设6BA0.2mg/L、0.6mg/L、1.0mg/L,NAA0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L,添加香蕉35g/L,马铃薯40g/L,活性炭0.5g/L,白糖30g/L,pH值为5.8作为增殖的培养基,以摸索适宜白芨增殖的配方。培養基设计处理为9个,如表2。把萌动抽高1cm左右高的幼芽,接种于处理1~9中,每处理接种20瓶,培养温度均为25±1℃,30d后进行结果统计。
  1.3.3 不同浓度的NAA对生根的影响
  把2~3cm高的无根苗接入如表3生根培养基中,每处理接种20瓶,每瓶20株。培养温度为25±1℃,40d后,对生根情况进行统计。
  1.3.4 添加不同浓度的香蕉、马铃薯对生根的影响
  生根的培养基以MS为基础培养基,设相同浓度的生长素NAA0.8mg/L、活性炭0.5g/L,白糖30kg/L,pH值为5.8,添加不同的香蕉、马铃薯浓度,把2~3cm左右高的无根苗接入表4中的处理1~4中,每处理接种培养基20瓶,每瓶20株,培养温度均为25±1℃,40d后进行结果统计。
  2 试验分析
  2.1 不同成熟度的种子对萌动的影响
  通过对两种类型的种子接种后60d进行观察,类型1种子萌动率高,基本达到100%,且萌动均匀,长势较快,整齐。而类型2的种子萌动率约73.6%,且萌动不均匀,长势相对较慢,不整齐。因此,可通过种皮的颜色判断种子成熟度,进行挑选种子繁殖。
  2.2 不同浓度6-BA和NAA对白芨增殖生长的影响
  植物激素6BA和NAA对白芨增殖生长影响如表5,从表5中可看出随着6BA浓度的增加,增殖倍数及茎粗壮度均逐渐增加,当6BA浓度达到1.0mg/L时,高生长逐渐缓慢,而当6BA浓度相同时,随着NAA浓度的增加,高生长随着增加。因此,MS+6BA1.0mg/L+NAA0.6mg/L+香蕉35g/L+马铃薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L。最适宜增殖的生长。
  2.3 不同浓度的NAA对白芨生根的影响
  生长素NAA对白芨的生根有促进作用,随着NAA浓度的增加,根系逐渐长而多,但当NAA浓度达到1.0mg/L时,根系会从细而柔软逐渐转变为粗而硬。因此,本实验中最适合白芨生根的培养基为MS+NAA0.8mg/L+香蕉35g/L+马铃薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L。
  2.4 添加不同浓度的香蕉、马铃薯对诱导根生长的影响
  从试验统计中看出,未添加香蕉、马铃薯的生根率100%,但根系相对较短而少,而添加有香蕉75g/L与香蕉35g/L+马铃薯40g/L两种培养基从生根率、根系平均长度及根系条数上区别不明显。而只有马铃薯的培养基中,生根率83.4%,根系平均长度只有3.2cm,根系条数平均为4.6条。因此,MS+NAA0.6mg/L+香蕉35g/L+马铃薯40g/L+活性炭0.5g/L+白糖30g/L为最适宜白芨生根生长培养基。
  3 结论与讨论
  (1)本试验只通过白芨种子的形态成熟方式来判断种子的成熟度,该方法很容易造成因目测不准而造成种子在消毒的过程中种皮破裂,种子流失,因此,还需进一步的以种子的生理成熟,来挑选诱导的种子。
  (2)在增殖生长中,随着6BA、NAA浓度的继续增加,是否更有利于增殖生长,有待更进一步的试验。
  参考文献
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  收稿日期:2018-11-16
  作者简介:吴玉华(1976-),女,广西荔浦人,中级工程师,本科,主要负责苗木培育工作。
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