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摘 要：采用GC-MS监测豆芽中4-氯苯氧乙酸、萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸、2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、吲哚乙酸、吲哚丁酸等7种植物生长调节剂的含量状况，以了解吉林省市售豆芽中常见植物生长调节剂的滥用情况。抽取的14批次豆芽样品中，4-氯苯氧乙酸、吲哚乙酸两种调节剂均有不同程度的检出，4-氯苯氧乙酸的检出值在0.07～0.99mg/kg范围，检出率高达71.4%；吲哚乙酸的检出值在0.77～40.82mg/kg范围，检出率达21.4%。说明，豆芽市场滥用植物生长调节剂的现象依然存在，豆芽市场有待进一步监管和规范。
关键词：豆芽 植物生长调节剂 4-氯苯氧乙酸 吲哚乙酸 含量监测
豆芽类蔬菜为广大市民经常食用的一类价廉物美的食品，其营养丰富，富含蛋白质、B族维生素和微量元素，且易于被人体消化吸收。一直以来，我国豆芽多以作坊式生产为主，在豆芽生产过程中肆意添加植物生长调节剂催发豆芽生长常有发生，添加的植物生长调节剂主要有2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、4-氯苯氧乙酸（CPA）、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等[1，2]，滥用植物生长调节剂会给健康带来风险，已成为目前食品安全领域的一个重大问题。
目前，植物生长调节剂的检测手段主要有液相色谱法[3，4]、液相色谱-质谱法[5]及气相色谱-质谱法[6]等。而国家食品安全风险监测工作要求采用GC/MS法同时检测豆芽中的植物生长调节剂，且要求豆芽中的2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、2，4-D、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等植物生长调节剂不得在豆芽样品中检出（检出限均为0.01mg/kg），以考察市售豆芽中植物生长调节剂的滥用状况，为进一步监管和规范豆芽市场提供数据支持。
1 实验部分
1.1 仪器
6890GC-5973MS气相色谱-质谱联用仪（美国Agilent公司）；分析天平（梅特勒-托利多公司），精度为0.1mg；超声波清洗器（江苏昆山市超声仪器有限公司）；旋涡混匀器、烘箱、氮吹仪、离心机（上海精科公司）。
1.2 材料与试剂
乙腈、甲酸、甲醇、乙酸乙酯、正己烷、盐酸、三氟化硼乙醚溶液、氯化钠、无水硫酸钠均分析纯；QuECHERS试剂盒（货号CLE008，300mg/管，杭州福裕科技服务有限公司）；MCX固相萃取柱（200mg/6mL，WATERS公司）。
2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、萘乙酸、2，4-D、吲哚乙酸、吲哚丁酸标准品，纯度均大于99.0%，购于德国Dr Ehrenstorfer GmbH公司
1.3 标准溶液及试剂配制
7种植物生长调节剂混合贮备液（1.0g/L）：分别称取0.025g（精确到0.1mg）上述植物生长调节剂标准品，用甲醇分别溶解并定容至25mL，4℃保存。
5.0mg/L植物生长调节剂混合应用液：各吸取1.0g/L植物生长调节剂贮备液0.5mL，用甲醇定容至100mL，4℃保存。20%乙酸乙酯-正己烷混合液：吸取2mL乙酸乙酯和8mL正己烷混合而成。10%三氟化硼甲醇衍生溶：吸取1mL三氟化硼乙醚溶液和9mL甲醇混合而成，现用现配。
1.4 样品处理
实验采用国家风险监测指定方法[7]对14批次豆芽样品进行测定。具体方法如下：
1.4.1 生长调节剂提取
称取捣碎的豆芽试样10.0g于50mL离心管中，加入20mL乙腈、40μL甲酸，漩涡混匀1min，超声提取30min，8000r/min离心5min，上清液转移至另一支50mL离心管中，加入3.0gNaCl，漩涡混匀；8000r/min离心5min，吸出乙腈层，用无水Na2SO4脱水后收集至圆底烧瓶内，50℃水浴真空浓缩至干，在圆底烧瓶内加入2 mL甲醇超声溶解。
1.4.2 生长调节剂净化
取上述甲醇样液1mL，加到QuECHERS试剂管中，混匀，静止5min，混匀，10000r/min离心2min，取上清液进行GC/MS分析测定2，4-D-乙酯和2，4-D-丁酯。
另取甲醇样液1mL，加入9mL 40m mol/L HCl，超声混匀，转移至离心管后8000r/min离心5min，上清液待净化。先用5mL甲醇、5mL水、5mL 40mmol/L HCl溶液活化MCS柱，活化结束后上清液转移到MCS柱内，待样液过柱后，用5mL水淋洗除杂，真空抽干柱内液体后加入5mL甲醇洗脱，收集于10mL具塞试管内，待衍生。
1.4.3 衍生化
将待衍生组分加入1mL10%三氟化硼甲醇衍生溶液，涡旋混匀，70℃加热衍生30min，取出冷却后再加入1.0mL20%乙酸乙酯-正己烷混合液和2mL纯水，涡旋混匀，4000r/min离心5min，吸出上层有机相，转移至进样瓶中进行GC/MS分析。分别吸取5.0mg/L植物生长调节剂混合应用液0.05，0.1，0.2，0.4和1.0mL，以甲醇定容至1.0mL与样品一起进行衍生测定，绘制含量（0.25，0.5，1.0，
2.0和5.0mg/L）與响应面积标准曲线。
1.5 分析条件
气相色谱条件DB-5MS毛细管色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm），进样口温度：260℃；载气：高纯氦气，纯度≥99.999%；载气流速：1.0mL/min；进样方式：不分流进样；进样量：1μL。升温程序：80℃，保持1min，以10℃/min升温至290℃，保持5min；质谱条件GC/MS接口温度：280℃；离子源温度：230℃；四级杆温度150℃；电离方式EI源；电离电压：70eV；选择离子监测模式，监测离子见表1。 2 结果与讨论
2.1 7种植物生长调节剂在豆芽中的检出情况
抽取14批次市售豆芽，其中黄豆芽5批次，绿豆芽9批次。检测结果显示，CPA和吲哚乙酸均有不同程度的检出，其他生长调节剂均未检出，具体检出情况见表2；总离子流图见图1。
2.2 结果分析
吉林省抽取的14批次豆芽样品中，CPA、吲哚乙酸两种调节剂均有不同程度的检出，CPA的检出值在0.07～0.99mg/kg范围，检出率高达71.4%；吲哚乙酸的检出值在0.77～40.82mg/kg范围，检出率达21.4%。目前国家食品安全风险监测工作要求豆芽中的2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、2，4-D、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等植物生长调节剂不得在豆芽样品中检出，由上述较高的检出率说明，豆芽市场滥用植物生长调节剂的现象依然存在，豆芽市场有待进一步监管和规范。
3 讨论
豆芽是人们喜欢的蔬菜之一，在生产过程中部分生产者喜欢用生长调节剂催芽，从而导致其生长调节剂含量偏高。由于目前国内还没有生长调节剂残留的检测方法标准和限量标准，加之植物中还有内源生长调节剂和外源生长调节剂之分，因此在实际检测过程中很难判定生长调节剂是否超标。
同时蔬菜中生长调节剂的检测方法也不尽完善，没有相应的国家标准。目前多采用液相色谱、液质联用、气质联用等方法，因此如何統一方法，建立标准，对完善蔬菜中生长调节剂的使用和监督有重要作用。
参考文献
[1] 苏芳菲，胡梦青，梅天资，等.2，4-D对小鼠精子毒性作用的研究[J].南昌大学学报（医学版），2013，53（1）：13-15.
[2] 徐爱东.我国蔬菜中常用植物生长调节剂的毒性及残留问题研究进展[J].中国蔬菜，2009（8）：1-6.
[3] 柴勇，杨俊英，李必全，等.市售豆芽中激素和生长调节剂检测分析[J].西南农业学报，2007，20（4）：698-701.
[4] 彭姝，张昊，郇正玉，高艾英.豆芽中三种常见激素的高效液相色谱检测法[J].山东农业科学，2010，2：95-98.
[5] 谢寒冰，周明莹，赵海峰，等.高效液相色谱—四极杆飞行时间质谱法同时检测豆芽中的3种外源植物激素残留[J].色谱，2014，32（5）：493-498.
[6] 李殷，徐霞，袁荷芳，等.气相色谱-质谱法分析市售豆芽中生长调节剂[J].安徽农业科学，2014，42（27）：9527-9528.
[7] 食药监食监三便函[2014]74号附件[S].
关键词：豆芽 植物生长调节剂 4-氯苯氧乙酸 吲哚乙酸 含量监测
豆芽类蔬菜为广大市民经常食用的一类价廉物美的食品，其营养丰富，富含蛋白质、B族维生素和微量元素，且易于被人体消化吸收。一直以来，我国豆芽多以作坊式生产为主，在豆芽生产过程中肆意添加植物生长调节剂催发豆芽生长常有发生，添加的植物生长调节剂主要有2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、4-氯苯氧乙酸（CPA）、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等[1，2]，滥用植物生长调节剂会给健康带来风险，已成为目前食品安全领域的一个重大问题。
目前，植物生长调节剂的检测手段主要有液相色谱法[3，4]、液相色谱-质谱法[5]及气相色谱-质谱法[6]等。而国家食品安全风险监测工作要求采用GC/MS法同时检测豆芽中的植物生长调节剂，且要求豆芽中的2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、2，4-D、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等植物生长调节剂不得在豆芽样品中检出（检出限均为0.01mg/kg），以考察市售豆芽中植物生长调节剂的滥用状况，为进一步监管和规范豆芽市场提供数据支持。
1 实验部分
1.1 仪器
6890GC-5973MS气相色谱-质谱联用仪（美国Agilent公司）；分析天平（梅特勒-托利多公司），精度为0.1mg；超声波清洗器（江苏昆山市超声仪器有限公司）；旋涡混匀器、烘箱、氮吹仪、离心机（上海精科公司）。
1.2 材料与试剂
乙腈、甲酸、甲醇、乙酸乙酯、正己烷、盐酸、三氟化硼乙醚溶液、氯化钠、无水硫酸钠均分析纯；QuECHERS试剂盒（货号CLE008，300mg/管，杭州福裕科技服务有限公司）；MCX固相萃取柱（200mg/6mL，WATERS公司）。
2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、萘乙酸、2，4-D、吲哚乙酸、吲哚丁酸标准品，纯度均大于99.0%，购于德国Dr Ehrenstorfer GmbH公司
1.3 标准溶液及试剂配制
7种植物生长调节剂混合贮备液（1.0g/L）：分别称取0.025g（精确到0.1mg）上述植物生长调节剂标准品，用甲醇分别溶解并定容至25mL，4℃保存。
5.0mg/L植物生长调节剂混合应用液：各吸取1.0g/L植物生长调节剂贮备液0.5mL，用甲醇定容至100mL，4℃保存。20%乙酸乙酯-正己烷混合液：吸取2mL乙酸乙酯和8mL正己烷混合而成。10%三氟化硼甲醇衍生溶：吸取1mL三氟化硼乙醚溶液和9mL甲醇混合而成，现用现配。
1.4 样品处理
实验采用国家风险监测指定方法[7]对14批次豆芽样品进行测定。具体方法如下：
1.4.1 生长调节剂提取
称取捣碎的豆芽试样10.0g于50mL离心管中，加入20mL乙腈、40μL甲酸，漩涡混匀1min，超声提取30min，8000r/min离心5min，上清液转移至另一支50mL离心管中，加入3.0gNaCl，漩涡混匀；8000r/min离心5min，吸出乙腈层，用无水Na2SO4脱水后收集至圆底烧瓶内，50℃水浴真空浓缩至干，在圆底烧瓶内加入2 mL甲醇超声溶解。
1.4.2 生长调节剂净化
取上述甲醇样液1mL，加到QuECHERS试剂管中，混匀，静止5min，混匀，10000r/min离心2min，取上清液进行GC/MS分析测定2，4-D-乙酯和2，4-D-丁酯。
另取甲醇样液1mL，加入9mL 40m mol/L HCl，超声混匀，转移至离心管后8000r/min离心5min，上清液待净化。先用5mL甲醇、5mL水、5mL 40mmol/L HCl溶液活化MCS柱，活化结束后上清液转移到MCS柱内，待样液过柱后，用5mL水淋洗除杂，真空抽干柱内液体后加入5mL甲醇洗脱，收集于10mL具塞试管内，待衍生。
1.4.3 衍生化
将待衍生组分加入1mL10%三氟化硼甲醇衍生溶液，涡旋混匀，70℃加热衍生30min，取出冷却后再加入1.0mL20%乙酸乙酯-正己烷混合液和2mL纯水，涡旋混匀，4000r/min离心5min，吸出上层有机相，转移至进样瓶中进行GC/MS分析。分别吸取5.0mg/L植物生长调节剂混合应用液0.05，0.1，0.2，0.4和1.0mL，以甲醇定容至1.0mL与样品一起进行衍生测定，绘制含量（0.25，0.5，1.0，
2.0和5.0mg/L）與响应面积标准曲线。
1.5 分析条件
气相色谱条件DB-5MS毛细管色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm），进样口温度：260℃；载气：高纯氦气，纯度≥99.999%；载气流速：1.0mL/min；进样方式：不分流进样；进样量：1μL。升温程序：80℃，保持1min，以10℃/min升温至290℃，保持5min；质谱条件GC/MS接口温度：280℃；离子源温度：230℃；四级杆温度150℃；电离方式EI源；电离电压：70eV；选择离子监测模式，监测离子见表1。 2 结果与讨论
2.1 7种植物生长调节剂在豆芽中的检出情况
抽取14批次市售豆芽，其中黄豆芽5批次，绿豆芽9批次。检测结果显示，CPA和吲哚乙酸均有不同程度的检出，其他生长调节剂均未检出，具体检出情况见表2；总离子流图见图1。
2.2 结果分析
吉林省抽取的14批次豆芽样品中，CPA、吲哚乙酸两种调节剂均有不同程度的检出，CPA的检出值在0.07～0.99mg/kg范围，检出率高达71.4%；吲哚乙酸的检出值在0.77～40.82mg/kg范围，检出率达21.4%。目前国家食品安全风险监测工作要求豆芽中的2，4-D-乙酯、2，4-D-丁酯、CPA、2，4-D、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等植物生长调节剂不得在豆芽样品中检出，由上述较高的检出率说明，豆芽市场滥用植物生长调节剂的现象依然存在，豆芽市场有待进一步监管和规范。
3 讨论
豆芽是人们喜欢的蔬菜之一，在生产过程中部分生产者喜欢用生长调节剂催芽，从而导致其生长调节剂含量偏高。由于目前国内还没有生长调节剂残留的检测方法标准和限量标准，加之植物中还有内源生长调节剂和外源生长调节剂之分，因此在实际检测过程中很难判定生长调节剂是否超标。
同时蔬菜中生长调节剂的检测方法也不尽完善，没有相应的国家标准。目前多采用液相色谱、液质联用、气质联用等方法，因此如何統一方法，建立标准，对完善蔬菜中生长调节剂的使用和监督有重要作用。
参考文献
[1] 苏芳菲，胡梦青，梅天资，等.2，4-D对小鼠精子毒性作用的研究[J].南昌大学学报（医学版），2013，53（1）：13-15.
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[3] 柴勇，杨俊英，李必全，等.市售豆芽中激素和生长调节剂检测分析[J].西南农业学报，2007，20（4）：698-701.
[4] 彭姝，张昊，郇正玉，高艾英.豆芽中三种常见激素的高效液相色谱检测法[J].山东农业科学，2010，2：95-98.
[5] 谢寒冰，周明莹，赵海峰，等.高效液相色谱—四极杆飞行时间质谱法同时检测豆芽中的3种外源植物激素残留[J].色谱，2014，32（5）：493-498.
[6] 李殷，徐霞，袁荷芳，等.气相色谱-质谱法分析市售豆芽中生长调节剂[J].安徽农业科学，2014，42（27）：9527-9528.
[7] 食药监食监三便函[2014]74号附件[S].