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【摘要】 目的 优选丹参中脂溶性成分丹参酮ⅡA的最佳提取工艺条件。丹参中丹参酮ⅡA是丹参制剂的重要活性成分，也是丹参成品制剂的主要检测指标，通过对丹参酮ⅡA提取方法的研究，对丹参制剂提取工艺的优化具有重要意义。方法 采用单因素实验法，根据当前丹参制剂的生产工艺，在提取时间、溶媒倍数、提取温度、溶媒浓度等方面进行试验，利用高效液相色谱法进行含量测定。结果 丹参酮ⅡA的最佳提取条件为，4倍体积量70%的乙醇，70℃温浸回流1小时，通过实验证明采用上述的提取方法，丹参提取物中丹参酮ⅡA转移率超过50%。结论 优选工艺得到的丹参酮ⅡA含量较高，工艺简单，快速，适用于丹参中丹参酮ⅡA的提取，对于丹参制剂的生产工艺优化有指导意义。
【关键词】 丹参 丹参酮ⅡA 提取 工艺优化
中图分类号：N945.15
丹参为唇形科植物丹参（Salvia miltiorrhiza Bge）的干燥根及根茎，味苦，性微寒；具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦功效。其化学成分主要为脂溶性成分和水溶性成分两大类。脂溶性成分主要包含丹参酮I、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、丹参酮V、丹参酮Ⅵ等；具有天然抗氧化活性、天然心血管药理作用以及抗菌消炎作用，还具有明显的抗肿瘤作用。水溶性成分主要为：丹参酸甲也称丹参素、D（+）3-13，4二羟基苯乳酸J、丹参酸乙、丹参酸丙、琥泊酸、丹参酚酸A、丹酚酸B等。其中脂溶性成分丹参酮ⅡA在临床上具有很好的药理活性，有抗凝血、促纤溶作用[1]。本文以丹参酮ⅡA为指标，从提取时间、提取溶媒倍数、提取温度、提取溶媒浓度等方面进行试验，以筛选最佳提取条件，为提取工艺优化奠定基础。
1 药品与试剂
丹参（购买于哈尔滨市药材公司，经鉴定为Salvia miltiorrhiza Bge），丹参酮ⅡA对照品（购于中国药品生物制品检定所），甲醇（分析纯）、乙醇（药用级）、蒸馏水。
2 方法
色谱条件的确定 高效液相色谱仪：SP-8100。色谱柱：YMC C18分析柱（4.6mm×150mm）。流动相：甲醇-水（75∶25）。检测波长：270nm。流速：1ml/min。
对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品，用分析甲醇配制成浓度为0.0502mg/ml的对照品溶液。
3 试验及结果
试验用丹参药材中丹参酮ⅡA的含量测定 取丹参粉末（过三号筛）0.3g，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测得的丹参药材中丹参酮ⅡA含量为0.53%。
提取时间对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，各加乙醇溶液200ml，在水浴中回流（微沸）不同的时间，滤过，滤液置200ml容量瓶中，放至室温，用乙醇溶液加至刻度，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液。按上述检测方法进行含量测定，通过实验可以看到提取丹参的时间在0.5小时至1小时，所得到的提取液中丹参酮ⅡA的含量没有显著提高，当提取时间延长至2小时时，提取液中丹参酮的含量反而下降，所以提取时间应不超过1小时。
溶媒倍数对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，分别加入不同量的乙醇溶液，在水浴中回流1小时（微沸），滤过，滤液置不同量的容量瓶中，放至室温，用乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上检测方法进行含量测定。提取所用溶媒体积倍数超过4倍时，提取液中丹参酮ⅡA的含量并没有明显的提高，选择4倍体积量是比较合理的。
提取时温度对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，各加乙醇溶液200ml，分别在不同温度的水浴中提取1小时，滤过，滤液置200ml容量瓶中放至室温，用乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上述检测方法进行含量测定，提取温度试验表明，提取温度在低于70℃时，提取液中丹参酮的含量随温度的升高而增加，提取温度超过70℃时，提取液中丹参酮ⅡA的含量无明显变化。
醇浓度对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，加入不同浓度的乙醇溶液各200ml，在70℃水浴中温浸1小时，滤过，滤液置200ml容量瓶中放至室温，用相应浓度的乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上述检测方法进行含量测定。当乙醇浓度大于70%时，醇提液中丹参酮ⅡA含量没有显著的提高，从经济上考虑，乙醇浓度应定为70%。
4 讨论
由以上结果可见，丹参酮ⅡA的最佳提取条件为：4倍体积量70%的乙醇，70℃温浸1小时。通过实验证明采用上述的对丹参酮ⅡA的提取方法进行提取，干燥过程采用低温减压干燥得到的丹参提取物中丹参酮ⅡA有50%以上能被保留下来。这是目前从效率上和经济上考虑比较合适的提取方法。
参考文献
[1]柴瑞震.丹参的药理研究近况.中国中医药科技，2003，10（6）：390～392.
【关键词】 丹参 丹参酮ⅡA 提取 工艺优化
中图分类号：N945.15
丹参为唇形科植物丹参（Salvia miltiorrhiza Bge）的干燥根及根茎，味苦，性微寒；具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦功效。其化学成分主要为脂溶性成分和水溶性成分两大类。脂溶性成分主要包含丹参酮I、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、丹参酮V、丹参酮Ⅵ等；具有天然抗氧化活性、天然心血管药理作用以及抗菌消炎作用，还具有明显的抗肿瘤作用。水溶性成分主要为：丹参酸甲也称丹参素、D（+）3-13，4二羟基苯乳酸J、丹参酸乙、丹参酸丙、琥泊酸、丹参酚酸A、丹酚酸B等。其中脂溶性成分丹参酮ⅡA在临床上具有很好的药理活性，有抗凝血、促纤溶作用[1]。本文以丹参酮ⅡA为指标，从提取时间、提取溶媒倍数、提取温度、提取溶媒浓度等方面进行试验，以筛选最佳提取条件，为提取工艺优化奠定基础。
1 药品与试剂
丹参（购买于哈尔滨市药材公司，经鉴定为Salvia miltiorrhiza Bge），丹参酮ⅡA对照品（购于中国药品生物制品检定所），甲醇（分析纯）、乙醇（药用级）、蒸馏水。
2 方法
色谱条件的确定 高效液相色谱仪：SP-8100。色谱柱：YMC C18分析柱（4.6mm×150mm）。流动相：甲醇-水（75∶25）。检测波长：270nm。流速：1ml/min。
对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品，用分析甲醇配制成浓度为0.0502mg/ml的对照品溶液。
3 试验及结果
试验用丹参药材中丹参酮ⅡA的含量测定 取丹参粉末（过三号筛）0.3g，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测得的丹参药材中丹参酮ⅡA含量为0.53%。
提取时间对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，各加乙醇溶液200ml，在水浴中回流（微沸）不同的时间，滤过，滤液置200ml容量瓶中，放至室温，用乙醇溶液加至刻度，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液。按上述检测方法进行含量测定，通过实验可以看到提取丹参的时间在0.5小时至1小时，所得到的提取液中丹参酮ⅡA的含量没有显著提高，当提取时间延长至2小时时，提取液中丹参酮的含量反而下降，所以提取时间应不超过1小时。
溶媒倍数对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，分别加入不同量的乙醇溶液，在水浴中回流1小时（微沸），滤过，滤液置不同量的容量瓶中，放至室温，用乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上检测方法进行含量测定。提取所用溶媒体积倍数超过4倍时，提取液中丹参酮ⅡA的含量并没有明显的提高，选择4倍体积量是比较合理的。
提取时温度对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，各加乙醇溶液200ml，分别在不同温度的水浴中提取1小时，滤过，滤液置200ml容量瓶中放至室温，用乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上述检测方法进行含量测定，提取温度试验表明，提取温度在低于70℃时，提取液中丹参酮的含量随温度的升高而增加，提取温度超过70℃时，提取液中丹参酮ⅡA的含量无明显变化。
醇浓度对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，加入不同浓度的乙醇溶液各200ml，在70℃水浴中温浸1小时，滤过，滤液置200ml容量瓶中放至室温，用相应浓度的乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上述检测方法进行含量测定。当乙醇浓度大于70%时，醇提液中丹参酮ⅡA含量没有显著的提高，从经济上考虑，乙醇浓度应定为70%。
4 讨论
由以上结果可见，丹参酮ⅡA的最佳提取条件为：4倍体积量70%的乙醇，70℃温浸1小时。通过实验证明采用上述的对丹参酮ⅡA的提取方法进行提取，干燥过程采用低温减压干燥得到的丹参提取物中丹参酮ⅡA有50%以上能被保留下来。这是目前从效率上和经济上考虑比较合适的提取方法。
参考文献
[1]柴瑞震.丹参的药理研究近况.中国中医药科技，2003，10（6）：390～392.