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摘要：目的：探讨复合菌菇提取粉对小鼠免疫力的影响。方法：将SPF级昆明种小鼠160只随机分为4个实验组，每个实验组再随机分为低、中、高剂量（0.21、0.42、1.25g/kg bw）组及对照组，连续给药30天，分别进行迟发型变态反应实验，并检测抗体生成细胞、测定血清溶血素;同时进行小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验，测定相关免疫学指标。结果：0.42g/kg bw、1.25g/kg bw剂量组能增加小鼠迟发型变态反应能力、抗体生成细胞数、血清半数溶血值、小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;3个剂量组对小鼠体重、脾脏/体重比重、胸腺/体重比值、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力均无明显影响（P>0.05）。结论：复合菌菇提取粉具有增强免疫力功能的作用。
[关键词]复合菌菇;香菇;茯苓;猴头菇;免疫;小鼠
菌类含有丰富的营养物质，多糖类、蛋白质、氨基酸、各种维生素及矿物质微量元素，其中多糖含量最高、活性最强。现代研究表明，菌类具有调节机体免疫功能、抗肿瘤、降胆固醇等作用。本实验参照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》2003版进行小鼠试验，观察复合菌菇提取粉对小鼠免疫力的影响作用。复合菌菇提取粉是以香菇提取物、茯苓提取物、猴头菇提取物及糊精混合制成的复合粉（猴头菇提取物40%、香菇提取物32%、茯苓提取物10%），经检测多糖含量9%。2.5g/袋，推荐成人每日1袋。
1 材料与方法
1.1 受试物复合菌菇提取粉，实验室自制，2.5g/袋。人体推荐剂量为每日1袋。
1.2 动物 SPF级昆明种小鼠[生产许可证号：SCXK（湘）2009-0012]160只，雌性各半。体重18-22g。
1.3 仪器 动物台秤;分析天平;离心机;氧化碳培养箱;离心机;恒温水浴锅;酶标仪、显微镜、游标卡尺等
1.4 动物分组与给药方法 试验动物随机分为4组，每组40只，分别进行;①碳廓清实验;②小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验;③迟发型变态反应试验;④脏体比值、半数溶血值（HC50）、抗体生成细胞数测定。4组再随机分为低、中、高剂量组和对照组，每组10只。根据人体口服推荐量，低、中高剂量组分别为0.21、0.42、1.25g/kg bw，灌胃体积0.02ml/g BW，对照组给予等体积蒸馏水，连续灌胃30天。
1.5 方法
本实验以0.21、0.42、1.25g/kg bw三个剂量经口给予小鼠复合菌菇提取粉一个月，进行小鼠细胞免疫功能，体液免疫功能和单核-巨噬细胞功能实验。方法参照《保健食品检验与评价技术规范》2003版。
1.6 统计学方法 先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用Dunnett-t法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对原始数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到方差齐性，则改用秩和检验，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的Tamhane’s T2检验进行两两比较，检验水准为α=0.05。
2 结果
2.1 复合菌菇提取粉对小鼠体重的影响 4组试验小组各剂量组试验初期、试验中期、试验末体重及实验期间体重增长与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
2.2 复合菌菇提取粉对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响复合菌菇提取粉各剂量组对小鼠脾脏/体重比值和胸腺/体重比值与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
2.3复合菌菇提取粉对小鼠细胞免疫功能的影响
对小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响 复合菌菇提取粉中、高剂量组小鼠足跖肿胀度大于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。低剂量组小鼠足跖肿胀度与对照组比较，无统计学意义（P>0.05）。
2.4复合菌菇提取粉对体液免疫的影响
对小鼠抗体生成细胞数的影响 复合菌菇提取粉中、高剂量组能增加小鼠抗体生成细胞数、半数溶血值（HC50）与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;低剂量组差异无统计学差异（P>0.05）。
2.3 复合菌菇提取粉对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
复合菌菇提取粉中、高剂量组对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清吞噬指数升高，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。低剂量组对小鼠碳廓清吞噬指数、各剂量组对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力未见明显影响，与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）
3 结论
香菇营养丰富，有显著的药用及滋补作用。香菇含丰富的蛋白质、粗多糖、 钙、磷等矿物质和维生素类物质[1]。香菇中的氨基酸异常丰富，构成蛋白质的20种氨基酸，香菇就有18种， 其中8种必需氨基酸都含有。具有显著作用的是其含的多糖。香菇多糖是一种胸腺依赖型T细胞导向， 并有巨噬细胞参与的免疫调节剂[2]。另外香菇多糖还能激活补体系统， 促进抗体形成， 使巨噬细胞溶酶体酶和IL-1分泌量增加， 而抑制巨噬细胞释放PGE、PGF、PGS。茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos（Schw.） Wolf.的干燥菌核，性平，味甘、淡，归心、脾、肾经。茯苓多糖和三萜类成分为茯苓的主要有效成份[3-4]。邓媛媛等[5]研究发现，茯苓乙醇提取物、水溶性物质部位组 均能增强由氢化可的松所致免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能;能显著提高小鼠细胞免疫因子IL-2和TNF-a的含量。猴头菇隶属于担子菌亚门，具有丰富的真菌多糖、猴头菌素等生物活性成分[6]。据现代药理研究发现猴头菇还具有提高机体免疫、抗肿瘤等作用[7]。复合菌菇提取粉是以香菇提取物、茯苓提取物、猴头菇提取物为原料制成的，含有丰富的多糖活性物质。本实验结果，0.42g/kg bw、1.25g/kg bw剂量组能增加小鼠迟发型变态反应能力、抗体生成细胞数、血清半数溶血值、小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。实验结果显示复合菌菇提取粉具有增强免疫力的作用。
参考文献
1.于淑池， 林泽平.香菇的营养保健及免疫调节作用[A].承德民族师专学报.2003年5月，23（2）：82-83
2.黄盖丽等.生命的化学[M].2001，21（ 5）： 371-372
3.徐斌，昝俊峰，何丽姗，等.27种菌种茯苓中茯苓酸分析比较研究[J].中草药，2010，41（4）：647-649.
4.徐琳本，肖梅英，樊湘红.羧甲基茯苓多糖口服液的免疫作用及抗肿瘤作用研究[J].中成药，2000，22（3）：222-224.
5.鄧媛媛，邵贝贝，王光忠，等.茯苓调节免疫功能有效物质的比较研究.中国医药指南.2012年4月，10（12）：94-95
6.黄萍，沈孝善.绿菇子实体菌株的原生质体分离及再生菌株的获得[J].西南农业学报，2001，14（1）：91-94.
7.Sun ZW，Zhang LX，Zhang B，etal. Structural characterisation and antioxidant properties of polysaccharides from the fruiting bodies of Russula virescens[J] .Food Chemistry，2010（118）：675-680.
[关键词]复合菌菇;香菇;茯苓;猴头菇;免疫;小鼠
菌类含有丰富的营养物质，多糖类、蛋白质、氨基酸、各种维生素及矿物质微量元素，其中多糖含量最高、活性最强。现代研究表明，菌类具有调节机体免疫功能、抗肿瘤、降胆固醇等作用。本实验参照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》2003版进行小鼠试验，观察复合菌菇提取粉对小鼠免疫力的影响作用。复合菌菇提取粉是以香菇提取物、茯苓提取物、猴头菇提取物及糊精混合制成的复合粉（猴头菇提取物40%、香菇提取物32%、茯苓提取物10%），经检测多糖含量9%。2.5g/袋，推荐成人每日1袋。
1 材料与方法
1.1 受试物复合菌菇提取粉，实验室自制，2.5g/袋。人体推荐剂量为每日1袋。
1.2 动物 SPF级昆明种小鼠[生产许可证号：SCXK（湘）2009-0012]160只，雌性各半。体重18-22g。
1.3 仪器 动物台秤;分析天平;离心机;氧化碳培养箱;离心机;恒温水浴锅;酶标仪、显微镜、游标卡尺等
1.4 动物分组与给药方法 试验动物随机分为4组，每组40只，分别进行;①碳廓清实验;②小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验;③迟发型变态反应试验;④脏体比值、半数溶血值（HC50）、抗体生成细胞数测定。4组再随机分为低、中、高剂量组和对照组，每组10只。根据人体口服推荐量，低、中高剂量组分别为0.21、0.42、1.25g/kg bw，灌胃体积0.02ml/g BW，对照组给予等体积蒸馏水，连续灌胃30天。
1.5 方法
本实验以0.21、0.42、1.25g/kg bw三个剂量经口给予小鼠复合菌菇提取粉一个月，进行小鼠细胞免疫功能，体液免疫功能和单核-巨噬细胞功能实验。方法参照《保健食品检验与评价技术规范》2003版。
1.6 统计学方法 先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用Dunnett-t法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对原始数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到方差齐性，则改用秩和检验，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的Tamhane’s T2检验进行两两比较，检验水准为α=0.05。
2 结果
2.1 复合菌菇提取粉对小鼠体重的影响 4组试验小组各剂量组试验初期、试验中期、试验末体重及实验期间体重增长与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
2.2 复合菌菇提取粉对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响复合菌菇提取粉各剂量组对小鼠脾脏/体重比值和胸腺/体重比值与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
2.3复合菌菇提取粉对小鼠细胞免疫功能的影响
对小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响 复合菌菇提取粉中、高剂量组小鼠足跖肿胀度大于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。低剂量组小鼠足跖肿胀度与对照组比较，无统计学意义（P>0.05）。
2.4复合菌菇提取粉对体液免疫的影响
对小鼠抗体生成细胞数的影响 复合菌菇提取粉中、高剂量组能增加小鼠抗体生成细胞数、半数溶血值（HC50）与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;低剂量组差异无统计学差异（P>0.05）。
2.3 复合菌菇提取粉对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
复合菌菇提取粉中、高剂量组对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清吞噬指数升高，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。低剂量组对小鼠碳廓清吞噬指数、各剂量组对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力未见明显影响，与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）
3 结论
香菇营养丰富，有显著的药用及滋补作用。香菇含丰富的蛋白质、粗多糖、 钙、磷等矿物质和维生素类物质[1]。香菇中的氨基酸异常丰富，构成蛋白质的20种氨基酸，香菇就有18种， 其中8种必需氨基酸都含有。具有显著作用的是其含的多糖。香菇多糖是一种胸腺依赖型T细胞导向， 并有巨噬细胞参与的免疫调节剂[2]。另外香菇多糖还能激活补体系统， 促进抗体形成， 使巨噬细胞溶酶体酶和IL-1分泌量增加， 而抑制巨噬细胞释放PGE、PGF、PGS。茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos（Schw.） Wolf.的干燥菌核，性平，味甘、淡，归心、脾、肾经。茯苓多糖和三萜类成分为茯苓的主要有效成份[3-4]。邓媛媛等[5]研究发现，茯苓乙醇提取物、水溶性物质部位组 均能增强由氢化可的松所致免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能;能显著提高小鼠细胞免疫因子IL-2和TNF-a的含量。猴头菇隶属于担子菌亚门，具有丰富的真菌多糖、猴头菌素等生物活性成分[6]。据现代药理研究发现猴头菇还具有提高机体免疫、抗肿瘤等作用[7]。复合菌菇提取粉是以香菇提取物、茯苓提取物、猴头菇提取物为原料制成的，含有丰富的多糖活性物质。本实验结果，0.42g/kg bw、1.25g/kg bw剂量组能增加小鼠迟发型变态反应能力、抗体生成细胞数、血清半数溶血值、小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。实验结果显示复合菌菇提取粉具有增强免疫力的作用。
参考文献
1.于淑池， 林泽平.香菇的营养保健及免疫调节作用[A].承德民族师专学报.2003年5月，23（2）：82-83
2.黄盖丽等.生命的化学[M].2001，21（ 5）： 371-372
3.徐斌，昝俊峰，何丽姗，等.27种菌种茯苓中茯苓酸分析比较研究[J].中草药，2010，41（4）：647-649.
4.徐琳本，肖梅英，樊湘红.羧甲基茯苓多糖口服液的免疫作用及抗肿瘤作用研究[J].中成药，2000，22（3）：222-224.
5.鄧媛媛，邵贝贝，王光忠，等.茯苓调节免疫功能有效物质的比较研究.中国医药指南.2012年4月，10（12）：94-95
6.黄萍，沈孝善.绿菇子实体菌株的原生质体分离及再生菌株的获得[J].西南农业学报，2001，14（1）：91-94.
7.Sun ZW，Zhang LX，Zhang B，etal. Structural characterisation and antioxidant properties of polysaccharides from the fruiting bodies of Russula virescens[J] .Food Chemistry，2010（118）：675-680.