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摘要：目的 研制含鲜铁皮石斛、苦杏仁与乌梅的保健食品并评价其清咽功能。 方法：用铁皮石斛复方咀嚼片灌胃SD大鼠30 d。以大鼠棉球植入实验、足趾肿胀实验，小鼠耳肿胀实验对产品的清咽功效进行评价。 结果：该保健食品各项指标均符合相关规定，其中、高剂量组能够明显降低肉芽肿净量和抑制Dextran T-40引起的大鼠足趾肿胀。 结论：铁皮石斛复方咀嚼片具有良好的清咽作用，可用于咽喉类疾病的辅助治疗。
关键词：鲜铁皮石斛;苦杏仁;乌梅;咽喉
咽痛 、咽痒 、干咳等是一种常见的症候，引起这些症状的主要原因是细菌的侵入或在呼吸系统的内部有炎症发生[1]。临床上经常应用消炎药和中成药治疗。但对于许多如吸烟、饮酒导致慢性咽喉炎以及特殊职业如教师、播音员、导游等职业患者， 更需采取一定的预防和保健措施。为了解“铁皮石斛复方咀嚼片”的清咽润喉作用的效果和安全性，对其进行了动物功能试验 ，现将结果报告如下。
1材料与方法
1.1受试物：铁皮石斛复方咀嚼片，其主要原料为鲜铁皮石斛、苦杏仁、乌梅（配比为7：2：1），规格为2.5g/片，样品置密封阴凉干燥处，供试验备用。人体推荐摄入量为7.5g/人/日，折合到其原料日服用量共为10g/人。
1.2实验动物：选用中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心[许可证号SCXK-（军）2012-0004]繁殖的180～220gSPF级SD健康雄性大鼠80只，按体重随机分为8组，每组10只，分别进行棉球植入实验（40只）和足趾肿胀实验（40只）;选用北京华卓康生物科技股份有限公司[许可证号SCXK-（京）2009-0007]繁殖的清洁级BALB/C健康雄性小鼠50只，按体重随机分为5组，每组10只，进行小鼠耳肿胀实验。
1.3 剂量选择与受试物给予方式：受试样品的人体推荐剂量为7.5g/人/日 （按60kg体重计），进行试验时去辅料，设低、中、高三个剂量组即0.625g/kg·bw/d、1.25g/kg·bw/d、1.875g/kg·bw/d，分别相当于人体推荐摄入量2.5倍、5倍、15倍，另设0g/kg·bw/d组以无菌水代替受试物。受试样品经粉碎后用无菌水配制，低、中、高剂量配制浓度分别为62.5mg/mL、125mg/mL、187.5mg/mL，按1.0mL/100g·bw灌胃。经口每日一次给予大、小鼠相应浓度的受试样品，连续灌胃一个月后进行指标测定。
1.4 主要仪器与试剂：HZF-B3000电子天平、BS223S电子天平、BP211D电子天平、恒温干燥箱、PV-200足趾容积测量仪、打孔器、微量注射器。乙醚、Dextran T-40、二甲苯。
1.5 试验方法：根据国食药监保化[2012]107号：清咽功能评价方法。
大鼠适应环境3天，按体重随机分为Ⅰ、Ⅱ两个大组，每个大组分为4个剂量组，每个剂量组10只大鼠。Ⅰ组大鼠进行棉球植入实验，Ⅱ组大鼠进行足趾肿胀实验。
小鼠适应环境3天，按体重随机分为4个剂量组，每个剂量组10只小鼠，进行小鼠耳肿胀实验。
1.6试验数据统计：用SPSS统计软件对实验数据进行统计处理。计量资料采用方差分析，需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，满足方差齐要求的数据，用多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
2结果与分析
2.1对大、小鼠体重的影响
给予受试物前后，大鼠的体重在受试物组与空白对照组间比较差异均无显著性（P>0.05）。小鼠体重在受试物组与模型对照组间比较及在模型对照组与空白对照组间比较，差异均无显著性（P>0.05）。即铁皮石斛复方咀嚼片对大、小鼠体重无不良影响。
2.2对大鼠肉芽肿形成的影响
由表1可知，经口给予大鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼片30天后，与空白对照组比较，受试物中、高剂量组组肉芽肿净量降低，差异有显著性（P<0.05）。即铁皮石斛复方咀嚼片在1.25g/kgBW、1.875g/kgBW组能降低棉球植入导致的肉芽肿净量。
2.3 对大鼠足趾肿胀情况的影响
由表2可见，经口给予大鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼30d后，受试物1.875g/kgBW组与空白对照组比较，注射Dextran T-40后1h、2h、4h和6h大鼠足趾肿胀率降低，差异均有显著性（P<0.05）。1.25g/kgBW组与空白对照组比较，注射Dextran T-40后4h、6h大鼠足趾肿胀率降低，差异均有显著性（P<0.05）。0.625g/kgBW组与空白对照组比较，注射Dextran T-40后6h大鼠足趾肿胀率降低，差异均有显著性（P<0.05）。
2.4 对小鼠耳肿胀实验的影响
由表3可见，经口给予小鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼片30d后，模型对照组与空白对照组比较，滴加二甲苯30分钟后耳廓肿胀率显著提高（P<0.01），即实验造模成功。受试物1.875g/kgBW组与模型对照组比较，滴加二甲苯30分钟后耳廓肿胀率与模型对照组两两比较P值为0.041（P<0.05），但受试物0.625g/kgBW、1.25g/kgBW、1.875g/kgBW与模型对照组方差分析的P值为0.101（P>0.05），即各组均属间差异无显著性。
3结论
经口给予小鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼片30d后，与空白对照组比较，该受试物1.875g/kgBW组能降低肉芽肿净量（P<0.05），降低注射Dextran T-40后1h、2h、4h和6h大鼠足趾肿胀率（P<0.05）;1.25g/kgBW组能降低肉芽肿净量（P<0.05），降低注射Dextran T-40后4h、6h大鼠足趾肿胀率（P<0.05）;0.625g/kgBW组降低注射Dextran T-40后6h大鼠足趾肿胀率（P<0.05）。经口给予小鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼片30d后，受试物1.875g/kgBW组与模型对照组比较，滴加二甲苯30分钟后耳廓肿胀率与模型对照组两两比较P值为0.041（P<0.05），但受试物0.625g/kgBW、1.25g/kgBW、1.875g/kgBW与模型对照组方差分析的P值为0.101（P>0.05），即各组均属间差异无显著性。即铁皮石斛复方咀嚼片未能减少小鼠耳廓肿胀率。该受试物对大小鼠体重增长均无不良影响。根据国家食品药品监督管理局国食药监保化[2012]107号附件9对清咽功能评价方法的判定标准可知，铁皮石斛复方咀嚼片功能动物实验结果阳性。证实铁皮石斛复方咀嚼片具有抗炎清咽功能，为其抗炎清咽的实验研究奠定了基础。
参考文献：
[1] Carraway MS ， Ghio AJ ，Carter JD， et ， al .Detection of Granu_locyte -Macrophage Colony -Stimulating Factor in Patients with Pulmonary Alverolar Proteinosis[ J] .Am J Respir CritCare Med ， 2000 ， 161 ：1294 -1299 .
[2]查學强，王军辉，潘利华等.石斛多糖体外抗氧化活性的研究[J].食品科学，2007，28（10）：90-93.
[3]周凝，刘彦臣，张贵君.咽炎的中医论治及进展.中医药学报，1999，13（2）：63.
[4] 华海清，宋起，李益生.现代养生保健中药辞典[M].北京人民卫生出版社，2002：590-591 .
关键词：鲜铁皮石斛;苦杏仁;乌梅;咽喉
咽痛 、咽痒 、干咳等是一种常见的症候，引起这些症状的主要原因是细菌的侵入或在呼吸系统的内部有炎症发生[1]。临床上经常应用消炎药和中成药治疗。但对于许多如吸烟、饮酒导致慢性咽喉炎以及特殊职业如教师、播音员、导游等职业患者， 更需采取一定的预防和保健措施。为了解“铁皮石斛复方咀嚼片”的清咽润喉作用的效果和安全性，对其进行了动物功能试验 ，现将结果报告如下。
1材料与方法
1.1受试物：铁皮石斛复方咀嚼片，其主要原料为鲜铁皮石斛、苦杏仁、乌梅（配比为7：2：1），规格为2.5g/片，样品置密封阴凉干燥处，供试验备用。人体推荐摄入量为7.5g/人/日，折合到其原料日服用量共为10g/人。
1.2实验动物：选用中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心[许可证号SCXK-（军）2012-0004]繁殖的180～220gSPF级SD健康雄性大鼠80只，按体重随机分为8组，每组10只，分别进行棉球植入实验（40只）和足趾肿胀实验（40只）;选用北京华卓康生物科技股份有限公司[许可证号SCXK-（京）2009-0007]繁殖的清洁级BALB/C健康雄性小鼠50只，按体重随机分为5组，每组10只，进行小鼠耳肿胀实验。
1.3 剂量选择与受试物给予方式：受试样品的人体推荐剂量为7.5g/人/日 （按60kg体重计），进行试验时去辅料，设低、中、高三个剂量组即0.625g/kg·bw/d、1.25g/kg·bw/d、1.875g/kg·bw/d，分别相当于人体推荐摄入量2.5倍、5倍、15倍，另设0g/kg·bw/d组以无菌水代替受试物。受试样品经粉碎后用无菌水配制，低、中、高剂量配制浓度分别为62.5mg/mL、125mg/mL、187.5mg/mL，按1.0mL/100g·bw灌胃。经口每日一次给予大、小鼠相应浓度的受试样品，连续灌胃一个月后进行指标测定。
1.4 主要仪器与试剂：HZF-B3000电子天平、BS223S电子天平、BP211D电子天平、恒温干燥箱、PV-200足趾容积测量仪、打孔器、微量注射器。乙醚、Dextran T-40、二甲苯。
1.5 试验方法：根据国食药监保化[2012]107号：清咽功能评价方法。
大鼠适应环境3天，按体重随机分为Ⅰ、Ⅱ两个大组，每个大组分为4个剂量组，每个剂量组10只大鼠。Ⅰ组大鼠进行棉球植入实验，Ⅱ组大鼠进行足趾肿胀实验。
小鼠适应环境3天，按体重随机分为4个剂量组，每个剂量组10只小鼠，进行小鼠耳肿胀实验。
1.6试验数据统计：用SPSS统计软件对实验数据进行统计处理。计量资料采用方差分析，需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，满足方差齐要求的数据，用多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
2结果与分析
2.1对大、小鼠体重的影响
给予受试物前后，大鼠的体重在受试物组与空白对照组间比较差异均无显著性（P>0.05）。小鼠体重在受试物组与模型对照组间比较及在模型对照组与空白对照组间比较，差异均无显著性（P>0.05）。即铁皮石斛复方咀嚼片对大、小鼠体重无不良影响。
2.2对大鼠肉芽肿形成的影响
由表1可知，经口给予大鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼片30天后，与空白对照组比较，受试物中、高剂量组组肉芽肿净量降低，差异有显著性（P<0.05）。即铁皮石斛复方咀嚼片在1.25g/kgBW、1.875g/kgBW组能降低棉球植入导致的肉芽肿净量。
2.3 对大鼠足趾肿胀情况的影响
由表2可见，经口给予大鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼30d后，受试物1.875g/kgBW组与空白对照组比较，注射Dextran T-40后1h、2h、4h和6h大鼠足趾肿胀率降低，差异均有显著性（P<0.05）。1.25g/kgBW组与空白对照组比较，注射Dextran T-40后4h、6h大鼠足趾肿胀率降低，差异均有显著性（P<0.05）。0.625g/kgBW组与空白对照组比较，注射Dextran T-40后6h大鼠足趾肿胀率降低，差异均有显著性（P<0.05）。
2.4 对小鼠耳肿胀实验的影响
由表3可见，经口给予小鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼片30d后，模型对照组与空白对照组比较，滴加二甲苯30分钟后耳廓肿胀率显著提高（P<0.01），即实验造模成功。受试物1.875g/kgBW组与模型对照组比较，滴加二甲苯30分钟后耳廓肿胀率与模型对照组两两比较P值为0.041（P<0.05），但受试物0.625g/kgBW、1.25g/kgBW、1.875g/kgBW与模型对照组方差分析的P值为0.101（P>0.05），即各组均属间差异无显著性。
3结论
经口给予小鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼片30d后，与空白对照组比较，该受试物1.875g/kgBW组能降低肉芽肿净量（P<0.05），降低注射Dextran T-40后1h、2h、4h和6h大鼠足趾肿胀率（P<0.05）;1.25g/kgBW组能降低肉芽肿净量（P<0.05），降低注射Dextran T-40后4h、6h大鼠足趾肿胀率（P<0.05）;0.625g/kgBW组降低注射Dextran T-40后6h大鼠足趾肿胀率（P<0.05）。经口给予小鼠不同剂量的铁皮石斛复方咀嚼片30d后，受试物1.875g/kgBW组与模型对照组比较，滴加二甲苯30分钟后耳廓肿胀率与模型对照组两两比较P值为0.041（P<0.05），但受试物0.625g/kgBW、1.25g/kgBW、1.875g/kgBW与模型对照组方差分析的P值为0.101（P>0.05），即各组均属间差异无显著性。即铁皮石斛复方咀嚼片未能减少小鼠耳廓肿胀率。该受试物对大小鼠体重增长均无不良影响。根据国家食品药品监督管理局国食药监保化[2012]107号附件9对清咽功能评价方法的判定标准可知，铁皮石斛复方咀嚼片功能动物实验结果阳性。证实铁皮石斛复方咀嚼片具有抗炎清咽功能，为其抗炎清咽的实验研究奠定了基础。
参考文献：
[1] Carraway MS ， Ghio AJ ，Carter JD， et ， al .Detection of Granu_locyte -Macrophage Colony -Stimulating Factor in Patients with Pulmonary Alverolar Proteinosis[ J] .Am J Respir CritCare Med ， 2000 ， 161 ：1294 -1299 .
[2]查學强，王军辉，潘利华等.石斛多糖体外抗氧化活性的研究[J].食品科学，2007，28（10）：90-93.
[3]周凝，刘彦臣，张贵君.咽炎的中医论治及进展.中医药学报，1999，13（2）：63.
[4] 华海清，宋起，李益生.现代养生保健中药辞典[M].北京人民卫生出版社，2002：590-591 .