【摘 要】
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目的:建立简单有效地获取IκB激酶复合物ε(inhibitor-κB kinaseε,IKKε)基因敲除小鼠血管内皮细胞的培养方法.方法:在超净台中取小鼠主动脉,撕去其外膜和脂肪组织,纵行剖
【机 构】
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南京医科大学附属南京第一医院心胸外科,江苏南京,210006;南京医科大学附属南京第一医院肾内科,江苏南京,210006
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目的:建立简单有效地获取IκB激酶复合物ε(inhibitor-κB kinaseε,IKKε)基因敲除小鼠血管内皮细胞的培养方法.方法:在超净台中取小鼠主动脉,撕去其外膜和脂肪组织,纵行剖开血管,切成1 mm × 1mm的血管块,内面朝下贴于培养皿底部,加入含内皮细胞生长辅助因子(ECGS)的DMEM培养液,贴壁培养；用倒置显微镜观察细胞形态并用Ⅷ因子相关抗原免疫荧光的方法进行鉴定.结果:72 h后在倒置显微镜下可见内皮细胞从血管块边缘游出,12～14 d血管内皮细胞融合成片,Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测呈阳性.结论:本方法可获取纯度高、结构和功能良好的IKKε基因敲除小鼠血管内皮细胞.
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