Smad信号通路在骨髓源性心肌干细胞向心肌分化中的作用

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目的研究Smad信号通路在BMP2诱导的骨髓源性心肌干细胞(MCSCs)向心肌分化中的作用,探讨MCSCs向心肌分化的信号转导机制。方法从SD大鼠骨髓中筛选MCSCs,用骨形态发生蛋白-2(BMP2)诱导向心肌定向分化。Westernblotting和免疫细胞化学法检测诱导后细胞内磷酸化的Smadl/5/8的表达及其随诱导时间在细胞内分布的变化。RTPCR检测诱导前后细胞内GATA4和心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)mRNA的表达。结果BMP2诱导后15min,细胞内可检测到磷酸化的Smadl/5/8的表达,30min1h表达明显增加,1h后开始降低,4h呈低表达。BMP2诱导后15min,磷酸化的Smadl/5/8仅见于胞质中,30min胞质和胞核均见表达,1h主要在胞核内表达。BMP2诱导后2周,细胞明显表达GATA4和cTnTmRNA。诱导后4周细胞呈现成熟心肌细胞样形态。用SB203580抑制Smad信号后,GATA4和cTnTmRNA的表达显著降低,细胞形态变化不明显。结论Smad信号通路在BMP2诱导MCSCs向心肌分化中发挥重要的介导作用。
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