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摘要：目的：对罗氏Cobas e601电化学发光分析仪肿瘤混合试剂进行相关性能的验证，判断混合的试剂能否可应用于日常检验工作。
方法：依据NCCLS颁布的EP15-A文件即《用户对精密度和准确度性能的核实实验-批准指南》对罗氏Cobas e601电化学发光分析仪肿瘤混合试剂进行精密度、正确度的核实实验，同时用新试剂与混合试剂分别检测5份血清标本的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125，并计算其相对偏倚。
结果：混合试剂检测血清肿瘤标志物AFP、CEA、CA199、CA153、CA125批内、批间精密度均与厂家声明一致，混合试剂检测卫生部临检中心肿瘤室间质评质控物的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125，结果均在室间质评允许范围内，用混合试剂与新试剂分别检测5份血清的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125，其结果的相对偏倚均小于10%。
结论：罗氏Cobas e601电化学发光分析仪肿瘤混合试剂的精密度、正确度均达到相关的检测质量要求，混合的肿瘤试剂盒可以应用于日常检验工作，从而降低检验成本。
关键词：Cobas e601电化学发光分析仪性能验证
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801（2013）04-0005-02
Cobas e601采用了电化学发光技术、生物素-链霉亲和素技术及二维条码技术，具有敏感度高、特异性强、可检测范围宽、检测速度快、标记物稳定无污染，结果准确稳定，操作简便，自动化程度高等诸多优点。[1]但该仪器使用的试剂均为原装进口，故检测成本较高，实际工作中发现每盒试剂内的试剂量常常超出试剂盒规定检测数量所需的量，但同一检测系统设定多余的试剂量不能再继续检测，造成很大的浪费[2，3]。本实验在保证检测质量的前提下验证混合的剩余试剂的性能是否达到日常检验工作的要求，从而达到降低检测成本的目的。
1材料
1.1仪器。罗氏Cobas e601电化学发光免疫分析仪，由罗氏公司制造生产。
2方法
2.1质控检测。使用低值和高值共2个水平的质控品对e601进行质控监测，各浓度质控每次试验前检测一次，质控值处于规定的质控范围内方可进行以下测试。
2.2混合试剂精密度测定。参考EP15-A文件进行重复性试验，取厂家提供的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125精密度声明附近的2个不同浓度水平的伯乐质控品，每天分析1个批次，每个浓度重复测定4次，连续5天，计算批内、批间均值及标准差。
2.3混合试剂正确度测定。
2.3.1混合试剂的正确度评价。参考EP15-A文件进行正确度评价试验，用AFP、CEA、CA199、CA153、CA125的混合试剂分布检测卫生部临检中心的肿瘤标志物室间能力比对试验质控物（批号201121-201125，201211-201215），根据卫生部临检中心提供的允许范围判断混合试剂的正确度情况。
3结果
3.2混合试剂正确度检测结果。
4讨论
对于一个新近研发的试剂或检验系统，生产商要对其性能进行评价，评价的内容包括精密度、正确度、分析灵敏度、分析特异性、可检测范围，生物参考区间。其中，一般使用EP5-A2文件[4]对精密度进行评价，使用EP9-A2-IR文件[5]进行正确度的性能评价。而对于一个新引进的试剂或检验系统，实验室一般最基本的任务是对其精密度和正确度进行核实验证，故本实验使用了EP15-A文件《用户对精密度和准确度性能的核实实验-批准指南》[6]对混合的原装试剂进行精密度和正确度的核实实验。由图1所得，实验结果显示混合的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125试剂批内精密度试验的标准差均大于厂家声明的批内标准差，但均小于计算所得的厂家声明的批内标准差验证值，说明这些项目的批内标准差与厂家声明的批内标准差无统计学意义（P>0.05），批内精密度验证通过。而混合的CEA及CA153试剂检测水平2质控品时，批间标准差小于厂家声明的批间标准差，而检测水平1质控品的批间标准差小于厂家声明的批间标准差验证值，其他几个肿瘤项目的混合试剂的批间标准差也小于厂家声明的批间标准差验证值，说明所有项目的混合试剂批间标准差与厂家声明的批间标准差无统计学意义（P>0.05），故批间精密度验证也通过。说明剩余试剂在混合后的稳定性能达到厂家声明的要求。由表2可知，使用混合的试剂盒检测卫生部临检中心的肿瘤标志物室间能力比对试验质控物的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125，所得的结果均在室间质评允许范围之内，以上五个项目的混合试剂盒的正确度验证试验也是通过的。说明用混合试剂检测所得结果与其它实验室同类型系统所测结果之间具有可比性，从而与其他不同实验室间的结果互认不会产生影响。通过以上的实验证明了混合试剂的精密度和正确度均满足日常检验的质量要求，性能稳定，准确可靠。而由表3可以知道，混合试剂和原装试剂检测患者的标本所产生的差异均在1/2EQA即10%以内，符合实验室设定的质量目标要求，说明用混合试剂盒检测患者血清标本所得的结果与用新试剂检测所得的结果具有一致性，不会对结果带来不良的影响，反而在保证检测质量的同时，有效地降低了检验成本，达到了双赢的效果。
对罗氏Cobas e601电化学发光分析仪肿瘤混合试剂性能的验证说明AFP、CEA、CA199、CA153、CA125的混合试剂盒检测结果是稳定可靠的。无论是与其他实验室还是与新试剂检测结果的比较都是具有可比性的。实验室通过这样的方法在保证检验质量的同时，大大降低了检测的成本，但笔者建议对于其他试剂盒如PCT、HBsAg、HIV、HCV等感染性标志物在使用上述方法进行混合后在进行标本检测前一定要做相关的验证实验对其性能做出评估和确认后再应用于临床，防止引起不必要的误差或纠纷。
参考文献
[1]谭浩.电化学发光免疫分析系统E170的应用评价[J].实用预防医学，2011，18（3）：527-528
[2]谷秀娟，武青青，李芳琴等.罗氏2010电化学分析仪死腔量试剂回收利用探讨[J].延安大学学报，2009，1（7），59-60
[3]马红霞，曹伟娟，张雪梅等.罗氏E170全自动电化学发光免疫分析仪剩余试剂再利用结果分析[J].检验医学，2012，7（3），206-209
[4]Evaluation of precision performance of quantative measurement methods； approved guideline-second edition CLSI document EP05-A2.Wayne，PA：Clinical and Laboratory Standards Institute，2004
[5]Method Comparison and Bias Estimation Using Samples；Approved Guideline-Second Edition（Interim Revision）.CLSI document EP09-A2-IR.Wayne，PA：Clinical and Laboratory Standards Institute，2010
[6]杨有业，张秀明.临床检验方法学评价[M].第1版.北京：人民卫生出版社，2008：110-117，136-140
方法：依据NCCLS颁布的EP15-A文件即《用户对精密度和准确度性能的核实实验-批准指南》对罗氏Cobas e601电化学发光分析仪肿瘤混合试剂进行精密度、正确度的核实实验，同时用新试剂与混合试剂分别检测5份血清标本的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125，并计算其相对偏倚。
结果：混合试剂检测血清肿瘤标志物AFP、CEA、CA199、CA153、CA125批内、批间精密度均与厂家声明一致，混合试剂检测卫生部临检中心肿瘤室间质评质控物的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125，结果均在室间质评允许范围内，用混合试剂与新试剂分别检测5份血清的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125，其结果的相对偏倚均小于10%。
结论：罗氏Cobas e601电化学发光分析仪肿瘤混合试剂的精密度、正确度均达到相关的检测质量要求，混合的肿瘤试剂盒可以应用于日常检验工作，从而降低检验成本。
关键词：Cobas e601电化学发光分析仪性能验证
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801（2013）04-0005-02
Cobas e601采用了电化学发光技术、生物素-链霉亲和素技术及二维条码技术，具有敏感度高、特异性强、可检测范围宽、检测速度快、标记物稳定无污染，结果准确稳定，操作简便，自动化程度高等诸多优点。[1]但该仪器使用的试剂均为原装进口，故检测成本较高，实际工作中发现每盒试剂内的试剂量常常超出试剂盒规定检测数量所需的量，但同一检测系统设定多余的试剂量不能再继续检测，造成很大的浪费[2，3]。本实验在保证检测质量的前提下验证混合的剩余试剂的性能是否达到日常检验工作的要求，从而达到降低检测成本的目的。
1材料
1.1仪器。罗氏Cobas e601电化学发光免疫分析仪，由罗氏公司制造生产。
2方法
2.1质控检测。使用低值和高值共2个水平的质控品对e601进行质控监测，各浓度质控每次试验前检测一次，质控值处于规定的质控范围内方可进行以下测试。
2.2混合试剂精密度测定。参考EP15-A文件进行重复性试验，取厂家提供的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125精密度声明附近的2个不同浓度水平的伯乐质控品，每天分析1个批次，每个浓度重复测定4次，连续5天，计算批内、批间均值及标准差。
2.3混合试剂正确度测定。
2.3.1混合试剂的正确度评价。参考EP15-A文件进行正确度评价试验，用AFP、CEA、CA199、CA153、CA125的混合试剂分布检测卫生部临检中心的肿瘤标志物室间能力比对试验质控物（批号201121-201125，201211-201215），根据卫生部临检中心提供的允许范围判断混合试剂的正确度情况。
3结果
3.2混合试剂正确度检测结果。
4讨论
对于一个新近研发的试剂或检验系统，生产商要对其性能进行评价，评价的内容包括精密度、正确度、分析灵敏度、分析特异性、可检测范围，生物参考区间。其中，一般使用EP5-A2文件[4]对精密度进行评价，使用EP9-A2-IR文件[5]进行正确度的性能评价。而对于一个新引进的试剂或检验系统，实验室一般最基本的任务是对其精密度和正确度进行核实验证，故本实验使用了EP15-A文件《用户对精密度和准确度性能的核实实验-批准指南》[6]对混合的原装试剂进行精密度和正确度的核实实验。由图1所得，实验结果显示混合的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125试剂批内精密度试验的标准差均大于厂家声明的批内标准差，但均小于计算所得的厂家声明的批内标准差验证值，说明这些项目的批内标准差与厂家声明的批内标准差无统计学意义（P>0.05），批内精密度验证通过。而混合的CEA及CA153试剂检测水平2质控品时，批间标准差小于厂家声明的批间标准差，而检测水平1质控品的批间标准差小于厂家声明的批间标准差验证值，其他几个肿瘤项目的混合试剂的批间标准差也小于厂家声明的批间标准差验证值，说明所有项目的混合试剂批间标准差与厂家声明的批间标准差无统计学意义（P>0.05），故批间精密度验证也通过。说明剩余试剂在混合后的稳定性能达到厂家声明的要求。由表2可知，使用混合的试剂盒检测卫生部临检中心的肿瘤标志物室间能力比对试验质控物的AFP、CEA、CA199、CA153、CA125，所得的结果均在室间质评允许范围之内，以上五个项目的混合试剂盒的正确度验证试验也是通过的。说明用混合试剂检测所得结果与其它实验室同类型系统所测结果之间具有可比性，从而与其他不同实验室间的结果互认不会产生影响。通过以上的实验证明了混合试剂的精密度和正确度均满足日常检验的质量要求，性能稳定，准确可靠。而由表3可以知道，混合试剂和原装试剂检测患者的标本所产生的差异均在1/2EQA即10%以内，符合实验室设定的质量目标要求，说明用混合试剂盒检测患者血清标本所得的结果与用新试剂检测所得的结果具有一致性，不会对结果带来不良的影响，反而在保证检测质量的同时，有效地降低了检验成本，达到了双赢的效果。
对罗氏Cobas e601电化学发光分析仪肿瘤混合试剂性能的验证说明AFP、CEA、CA199、CA153、CA125的混合试剂盒检测结果是稳定可靠的。无论是与其他实验室还是与新试剂检测结果的比较都是具有可比性的。实验室通过这样的方法在保证检验质量的同时，大大降低了检测的成本，但笔者建议对于其他试剂盒如PCT、HBsAg、HIV、HCV等感染性标志物在使用上述方法进行混合后在进行标本检测前一定要做相关的验证实验对其性能做出评估和确认后再应用于临床，防止引起不必要的误差或纠纷。
参考文献
[1]谭浩.电化学发光免疫分析系统E170的应用评价[J].实用预防医学，2011，18（3）：527-528
[2]谷秀娟，武青青，李芳琴等.罗氏2010电化学分析仪死腔量试剂回收利用探讨[J].延安大学学报，2009，1（7），59-60
[3]马红霞，曹伟娟，张雪梅等.罗氏E170全自动电化学发光免疫分析仪剩余试剂再利用结果分析[J].检验医学，2012，7（3），206-209
[4]Evaluation of precision performance of quantative measurement methods； approved guideline-second edition CLSI document EP05-A2.Wayne，PA：Clinical and Laboratory Standards Institute，2004
[5]Method Comparison and Bias Estimation Using Samples；Approved Guideline-Second Edition（Interim Revision）.CLSI document EP09-A2-IR.Wayne，PA：Clinical and Laboratory Standards Institute，2010
[6]杨有业，张秀明.临床检验方法学评价[M].第1版.北京：人民卫生出版社，2008：110-117，136-140