【摘 要】
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目的:获取重组鼠IL-28(m IL-28)纯化蛋白,制备多克隆抗体。方法:用PCR技术扩增鼠IL-28成熟蛋白的编码序列,克隆入原核表达载体pET-30,构建融合表达载体pET-30 a-m IL-28,转化大肠
【机 构】
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江苏大学临床医学院,江苏大学附属人民医院呼吸内科
【基金项目】
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卫生部基金项目资助(wkj2006-02-206)
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目的:获取重组鼠IL-28(m IL-28)纯化蛋白,制备多克隆抗体。方法:用PCR技术扩增鼠IL-28成熟蛋白的编码序列,克隆入原核表达载体pET-30,构建融合表达载体pET-30 a-m IL-28,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达IL-28融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化,然后免疫6-8周龄鸡,制备多克隆抗体,采用ELISA检测抗体效价。结果:成功构建了表达载体pET-30 a-m IL-28,DNA序列测定结果与预期结果一致。在37℃培养条件下,IPTG诱导表达的IL-28融合蛋
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