【摘 要】
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[目的]研究嘌呤受体P2X7和谷氨酸受体NMDA激活诱导大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的相互作用机制. [方法]①对新生Long-Evan大鼠进行上丘注射荧光标记物Aminostilbamidine标
【机 构】
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眼科学国家重点实验室//中山大学中山眼科中心,厦门大学医学院眼科研究所厦门眼科中心,宾夕法尼亚大学医学院生理学系
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[目的]研究嘌呤受体P2X7和谷氨酸受体NMDA激活诱导大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的相互作用机制. [方法]①对新生Long-Evan大鼠进行上丘注射荧光标记物Aminostilbamidine标记RGC,NMDA受体通道拮抗剂MK-801、APV和Memantine分别与P2X7受体激动剂BzATP共培养,检测它们对体外培养RGC存活率的影响;②未经Aminostilbamidine标记的新生大鼠RGC,以10 μmol/L钙离子(Ca2+)荧光染料Fura-2标记后,利用Ca2+影像测定仪分别测定BzATP及三种NMDA拮抗剂对RGC胞内Ca2+浓度的影响.[结果](1)三种NMDA拮抗剂均分别不同程度阻断BzATP引起的RGC凋亡.BzATP在50 μmol/L浓度下,约杀死(36%±2%)的RGC,而MK-801(10 μmol/L)、APV(100 μmol/L)和Memantine(100 μmol/L)则均可明显减轻BzATP对RGC的毒性作用,使RGC存活率分别提高至(96%±4%,P＜0.001)、(80%±5%,P=0.010)和(76%±9%,P=0.144).(2)BzATP可引起RGC胞内Ca2+持续升高,在50 μmol/L浓度下可使胞内Ca2+升高至(1183±109)nmol/L.而MK-801(10 μmol/L)、APV(300 μmol/L)和Memantine(30 μmol/L)则均可显著降低BzATP介导的Ca2+升高幅度,分别为(76%±7%,P=0.003)、(51%±17%,P=0.003)和(55%±16%,P=0.025). [结论]NMDA受体拮抗剂可阻断嘌呤受体P2X7激活诱导的RGC凋亡.P2X7受体和NMDA受体通道激活可能共同介导着兴奋性神经毒作用且P2X7在NMDA受体的上一环节先起作用.
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