【摘 要】
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试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体s，加倍后连入pEGFP—N1框架载体以构建
【机 构】
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内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古自治区生物制造重点实验室
【基金项目】
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国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008008)
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试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体s，加倍后连入pEGFP—N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S，转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛选单克隆，并通过PCR在DNA、RNA水平检测阳性克隆。基因合成后测序结果显示序列正确，酶切得到正确目的条带，筛选出阳性克隆并且可以在基因组及cDNA上扩增出目的片段。本研究成功将蜘蛛牵丝蛋白基因转入新疆美利奴细毛羊细胞，并在RNA水平表达，为培育毛囊特异表达蜘蛛牵丝
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