【摘 要】
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目的 通过探讨转录因子KLF4在调节角蛋白17(Keratin 17,KRT17)表达中的作用,揭示银屑病患者皮损中KRT17过度表达的分子机制.方法 以18例寻常型银屑病患者皮损组织为银屑病组,
【机 构】
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长沙市第一医院 皮肤科 长沙 410005
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目的 通过探讨转录因子KLF4在调节角蛋白17(Keratin 17,KRT17)表达中的作用,揭示银屑病患者皮损中KRT17过度表达的分子机制.方法 以18例寻常型银屑病患者皮损组织为银屑病组,10例健康人皮肤为对照组.采用实时荧光定量PCR和West blot检测银屑病皮损组织及正常皮肤标本中KLF4的表达水平,检测HaCat细胞中KLF4过表达叠加组蛋白乙酰转移酶EP300(E1A binding protein p300,EP300)干扰后KRT17的表达水平.染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)检测银屑病皮损组织及正常皮肤样本中KRT17启动子区KLF4结合水平及组蛋白H3乙酰化水平,检测HaCat细胞中KLF4过表达叠加EP300干扰后KRT17启动子区KLF4结合水平及组蛋白H3乙酰化水平.免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)检测KLF4与EP300的相互作用.结果 银屑病组皮损组织KLF4表达水平、KRT17启动子区KLF4结合水平及组蛋白H3乙酰化水平均高于对照组皮肤标本(P<0.01).与转染对照组相比,KLF4过表达组KRT17表达水平升高(P<0.01);KLF4过表达叠加EP300干扰组KRT17表达水平低于KLF4过表达组(P<0.01)和转染对照组(P<0.05).与转染对照组相比,KLF4过表达组KRT17启动子区组蛋白H3乙酰化水平升高(P<0.01);KLF4过表达叠加EP300干扰组KRT17启动子区组蛋白H3乙酰化水平低于KLF4过表达组(P<0.01)和对照组(P<0.01).Co-IP证实KLF4与EP300能形成蛋白复合体.结论 过度表达的KLF4通过协同EP300上调KRT17启动子区组蛋白H3乙酰化水平,介导银屑病患者皮损中KRT17的过度表达.
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