【摘 要】
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探究箭叶淫羊藿水提物对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的干预作用,为临床治疗肺纤维化提供数据支撑。将90只雄性C57/BL6小鼠随机分为正常组(CON,n=10),模型组(BLM,n=20),吡非尼酮组(PFD,270 mg·kg-1,n=15),箭叶淫羊藿低剂量组 (EPI-L,1.67 g·kg-1,n=15),箭叶淫羊藿中剂量组 (EPI-M,3.33 g·kg-1,n=15),箭叶淫羊藿高剂量组
【基金项目】
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国家重点研发计划-中医药现代化研究专项(2017YFC1702800,2019YFC1708802); 河南省重大科技专项(171100310500); 河南省高层次人才特殊支持计划“中原千人计划”-中原领军人才项目(ZYQR201810080); 河南省博士后科研启动项目(2021002073)
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探究箭叶淫羊藿水提物对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的干预作用,为临床治疗肺纤维化提供数据支撑。将90只雄性C57/BL6小鼠随机分为正常组(CON,n=10),模型组(BLM,n=20),吡非尼酮组(PFD,270 mg·kg-1,n=15),箭叶淫羊藿低剂量组 (EPI-L,1.67 g·kg-1,n=15),箭叶淫羊藿中剂量组 (EPI-M,3.33 g·kg-1,n=15),箭叶淫羊藿高剂量组 (EPI-H,6.67 g·kg-1,n=15) 剂量组。除正常组外,其余5组气管滴注博来霉素(5 mg·kg-1)构建肺纤维化模型,正常组气管滴注等量生理盐水。造模后次日,各组灌胃相应的药物连续治疗21 d,期间统计小鼠存活率。灌胃结束后取材计算肺系数,HE和Masson染色观察小鼠肺组织形态和胶原沉积情况;流式细胞术检测肺组织细胞悬液ROS水平;酶活检测肺组织中GSH-Px、T-SOD和MDA的水平;TUNEL染色检测肺组织细胞凋亡情况;ELISE检测肺组织中IL-6、CCL-2、MMP-8、TGF-β1、α-SMA、E-cadherin、collagen Ⅰ及fibronectin的含量;免疫组化检测肺组织中F4/80、Ly-6G、TGF-β1及collagen Ⅰ蛋白水平;qRT-PCR法检测肺组织中CCL-2、IL-6、MMP-7 mRNA水平;碱水解法检测肺组织HYP含量;免疫荧光检测α-SMA以及E-cadherin蛋白表达水平;Western blot检测肺组织中α-SMA、vimentin、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平。实验结果显示箭叶淫羊藿水提物可显著提高肺纤维化小鼠存活率,降低其肺系数,改善肺组织病理损伤与胶原沉积;改善氧化应激损伤以及减少凋亡细胞数目;降低肺组织中F4/80、Ly-6G蛋白水平与CCL-2、IL-6、MMP-7 mRNA表达水平,以及肺泡灌洗液中IL-6、CCL-2、MMP-8的含量;此外,箭叶淫羊藿水提物显著降低肺组织中HYP、TGF-β1、α-SMA、collagen Ⅰ、fibronectin、vimentin的水平,升高E-cadherin、N-cadherin水平。箭叶淫羊藿水提物可通过抑制胶原沉积,改善氧化应激失衡及炎症反应缓解博来霉素诱导的肺纤维化小鼠症状,其机制可能与调控上皮间质转化相关分子的表达有关。
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