【摘 要】
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目的观察携带肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)基因的溶瘤腺病毒(ZD55-TRAIL)联合表柔比星(EPB)对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响。方法将转染倍数(MOI)= 10.0的ZD55-TRAIL联合1 mg/L的EPB、MOI= 10.0的ZD55-TRAIL、1 mg/L的EPB、MOI= 10.0的ZD55-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和磷酸盐缓冲液(PBS)分别作用于膀胱癌
【机 构】
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目的观察携带肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)基因的溶瘤腺病毒(ZD55-TRAIL)联合表柔比星(EPB)对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响。
方法将转染倍数(MOI)= 10.0的ZD55-TRAIL联合1 mg/L的EPB、MOI= 10.0的ZD55-TRAIL、1 mg/L的EPB、MOI= 10.0的ZD55-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和磷酸盐缓冲液(PBS)分别作用于膀胱癌T24细胞。反转录-聚合酶链反应(RTPCR)方法检测TRAIL基因mRNA的表达;Western blot法检测腺病毒TRAIL蛋白的表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞存活率;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)法检测细胞凋亡。
结果RT-PCR结果示:ZD55-TRAIL成功的将TRAIL基因转入到膀胱癌细胞中,并且ZD55-TRAIL联合EPB组和ZD55-TRAIL组mRNA表达差异无统计学意义(P> 0.05)。Western blot结果表明ZD55-TRAIL联合EPB作用的T24细胞能高效表达TRAIL。CCK-8法检测结果表明干预4 d后,MOI= 10.0 的ZD55-TRAIL+1 mg/L EPB细胞存活率为(18.44±2.38)%,与对应剂量的ZD55-TRAIL(40.75±4.12)%、EPB(53.62±1.41)%、ZD55-EGFP(61.65±4.53)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。单独使用EPB在2 d要达到与联合治疗(MOI= 10.0的ZD55-TRAIL+1 mg/L EPB)相同的效果,其浓度需达到2 mg/L;在3 d则需更高的浓度4 mg/L。细胞凋亡检测结果ZD55-TRAIL联合EPB组晚期凋亡细胞数目分别为ZD55-TRAIL、EPB、ZD55-EGFP的2.01、2.21、2.95倍,差异有统计学意义(P<0.01)。
结论携带TRAIL基因的溶瘤腺病毒ZD55-TRAIL联合化疗药物EPB对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡有协同作用。
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