MicroRNA-125b对人牙周膜干细胞成骨分化的影响

来源 :上海口腔医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gsdx2009
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目的:探讨micro RNA-125b(mi R-125b)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSCs)成骨分化的影响。方法:利用组织块法分离培养PDLSCs,流式细胞术检测细胞表面标志分子。PDLSCs经mi R-125b模拟物或mi R-125b抑制剂转染后,采用MTT法和LDH试剂盒分别检测细胞活性和细胞毒性,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和细胞内钙离子水平均以相应试剂盒检测,Western印迹法和RT-q PCR检测成骨相关基因水平。双荧光素酶基因报告实验检测mi R-125b对细胞间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)的靶向调控作用。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果 :体外分离培养的PDLSCs呈现间充质干细胞特性。转染mi R-125b mimic后,PDLSCs的活性下降,毒性上升,ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子水平均显著下降;相反,antimi R125b提高了PDLSCs的细胞活性、ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子的表达。双荧光素酶基因报告实验结果表明,mi R-125b能够靶向降低Cx43基因水平。而在Cx43过表达的PDLSCs中,mi R-125b模拟物对PDLSCs成骨分化的作用被反转。结论:mi R-125b通过靶向下调Cx43而抑制PDLSCs的成骨分化。
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