转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:annhongmay
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提取拟南芥幼根总RNA,进行RT-PCR逆转录,产物测序,将其构建到含Km(带内含子)筛选标记的植物双元表达载体上,根癌农杆菌介导法将AtKup1基因导入烟草,对转化子进行PCR扩增、GUS染色、Southern杂交和AtKup1基因mRNA荧光定量PCR分析,并进行烟叶内在成分化验分析.PCR获得2100bp左右扩增产物,测序结果证实扩增产物序列与拟南芥AtKup1基因(Genbank No:AF029876)一致;得到GUS染色阳性的AtKup1基因转化烟草材料29株.经PCR扩增、分子杂交检测证实A
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